Question

【题目】科研人员利用精子作为载体，将人胰岛素基因（hINS）转入绵羊体内（图中BLG是羊的乳腺蛋白基因），以获得动物乳腺生物反应器，使羊的乳汁中含有人胰岛素。其技术流程如下：

请回答下列相关问题：

（1）构建的BLG-hINS重组质粒中目的基因的首端是________________，将重组质粒导入精子中的方法是_________________。

（2）给供体母羊注射促性腺激素，目的是使其________。在体外受精前，要对精子进行_______处理。在胚胎移植过程中，受体选择好后要用激素进行_________处理，其目的是_________，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。

（3）为获得转基因母羊，在进行移植前，还需取滋养层细胞进行___________。将早期胚胎移植至代孕母羊体内时，不宜选择_________（填“原肠胚”、“桑椹胚”或“囊胚”）时期的胚胎。

（4）欲增加图中早期胚胎的数量，可通过胚胎工程中的___________技术来实现，在对囊胚进行操作时应注意________________________。

Answer 1

【答案】乳腺蛋白基因启动子显微注射技术超数排卵获能同期发情使受体和供体有相同的生理状态（生理环境）（DNA分析）性别鉴定原肠胚胚胎分割将内细胞团均等分割

【解析】

解答本题需要掌握以下知识点：1、将目的基因导入不同的受体细胞所采用的方法不同。导入植物细胞：农杆菌转化法（转基因抗虫棉用的是花粉管通道法）；导入动物细胞：显微注射技术（注射入受精卵中）；导入原核生物：一般是将细菌用氯化钙处理，以增大细菌细胞壁的通透性，使含有目的基因的重组质粒进入受体细胞。体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精；2、胚胎移植的基本程序主要包括：；①对供、受体的选择和处理。选择遗传特性和生产性能优秀的供体，有健康的体质和正常繁殖能力的受体，供体和受体是同一物种。并用激素进行同期发情处理，用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理。②配种或人工授精。③对胚胎的收集、检查、培养或保存。配种或输精后第7天，用特制的冲卵装置，把供体母牛子宫内的胚胎冲洗出来（也叫冲卵）。对胚胎进行质量检查，此时的胚胎应发育到桑椹或胚囊胚阶段。直接向受体移植或放入-196℃的液氮中保存。④对胚胎进行移植。⑤移植后的检查。对受体母牛进行是否妊娠的检查。3、动物早期胚胎培养，培养液的成分无机盐、有机盐类、维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分以及动物血清等。

（1）重组质粒除了含有目的基因以外，还必须有启动子、终止子及标记基因，其中乳腺蛋白基因启动子位于目的基因的首端，将目的基因导入不同受体细胞有不同的方法，将重组质粒导入精子（动物细胞）中的方法是显微注射技术。

（2）对供体母羊注射促性腺激素可促使其超数排卵。采集的精子需要经过获能处理才具备受精能力。在胚胎移植过程中，用激素对供受体进行同期发情处理的目的是使供、受体的生理状态相同，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。

（3）只有母羊能分泌乳汁，为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行性别鉴定，以选择母羊的胚胎进行移植，取滋养层细胞进行（DNA分析）性别鉴定不会影响胚胎正常发育。胚胎移植时，因为原肠胚时期的细胞已经分化为三个胚层且已经开始与母体建立生理与组织上的联系，因此一般选用桑椹胚或囊胚进行胚胎移植，而不能选用原肠胚。

（4）胚胎分割是指借助显微操作技术或徒手操作方法切割早期胚胎成二、四等多等份再移植给受体母畜，从而获得同卵双胎或多胎的生物学新技术。欲增加图中早期胚胎的数量，可通过胚胎工程中的胚胎分割技术来实现，囊胚阶段的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，如果分割不均匀，会影响着分割的胚胎发育，因此在对囊胚进行操作时应注意将内细胞团均等分割。