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    下图所示限制性核酸内切酶切割某DNA的过程，从图中可知，该限制性核酸内切酶能识别的碱基序列及切点是
    [     ]
    A．CTTAAG，切点在C和T之间
    B．CTTAAC，切点在G和A之间
    C．GAATTC，切点在G和A之间
    D．CTTAAG，切点在C和T之间
    C
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    科目：高中生物 来源：2013届江苏省扬州中学高三最后一次模拟考试生物试卷（带解析） 题型：综合题

    回答下列关于基因工程的问题。
    草甘膦是一种广谱除草剂，其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成，最终导致植物死亡。但是，它的使用有时也会影响到植物的正常生长。目前，已发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因，若将该基因转入植物细胞内，从而获得的转基因植物就能耐受高浓度的草甘膦。
    下图A-F表示6株植物，其中，植物A和D对草甘膦敏感，B和E对草甘膦天然具有抗性，C和F则经过了转基因处理，但是是否成功还未知。图1和2分别表示两段DNA序列。表格中1-4分别表示4种限制性核酸内切酶的酶切位点。据图回答下列问题：
    .


    （1）若A-C浇清水，D-F浇的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成长的是_________。
    （2）若要从大肠杆菌中筛选出含EPSPS基因的突变菌株甲，在大肠杆菌培养基中还必须加入 ___________。
    （3）假设位于EPSPS基因两侧的DNA序列均如图I所示，则应选择表中酶__________进行酶切；若位于EPSPS基因两侧的DNA序列分别如图I和II所示，则应选择表中酶__________ 进行酶切。
    （4）假设大肠杆菌突变菌株甲中EPSPS基因的右侧序列如图II所示，请在方框内画出经酶切后产生的两个末端的碱基序列。（2分）

    （5）假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中，但植物F仍没有表现出抗性，分析可能的原因_______________________________________________________________。
    下图甲是某目的基因（4.0kb，1kb=1000对碱基）与大肠杆菌pUC18质粒（2.7kb）重组的示意图。图中Ap′是抗氨苄青霉素基因，lacZ是显色基因，其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧，其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色。（图乙中深色圆点即为蓝色菌落）

    （6）图乙的培养基中含有氨苄青霉素，请判断图乙中所出现的白色和蓝色两种菌落中，何种会含有重组质粒。___________。
    （7）现用EcoRI酶切质粒，酶切后进行电泳观察，若出现长度为_________kb和      kb的片段，则可以判断该质粒已与目的基因重组成功。（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRI的识别位点之间的碱基对忽略不计）

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    科目：高中生物 来源：2013-2014学年湖北武汉武昌区高三上期期末学业质量生物卷（解析版） 题型：综合题

    猪的基因和人类的基因存在一定的相似度。据报道经特殊处理的猪皮可在人身上存活3周左右，起保护创面免受感染的作用。移植猪皮后，还要在猪皮上开很多小口，在小口处植入患者的自体皮肤组织，自体皮肤慢慢生长，逐渐覆盖原先创面，而猪皮最终会掉光。为了使移植的猪皮存活更长时间，有人设法导入人的相关基因（用P表示），获得转基因小白猪。其简要流程如下图所示：

    据图中信息并结合课本知识回答：

    （1）过程①中形成重组研蛆常用的酶有限制性核酸内切酶和            ；将目的基因导入成纤维细胞常用的方法是         。

    （2）过程②中，常用        酶处理，将皮肤组织块分散戍单个成纤维细胞。在培养成纤维细胞时需要满足的条件是无菌、无毒、通气、适宜的温度、pH以及           。

    （3）图中的卵母细胞应在体外培养到       ，并作除去细胞核的处理；过程③中所用的技术是    ；能代替图中卵母细胞的还可以是                。

    （4）图示技术除可用于器官移植外，还用于                 。

     

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    科目：高中生物 来源：2014届浙江省杭州市高三上学期第一次月考生物卷（解析版） 题型：选择题

    对下图所示黏性末端的说法正确的是

    A．甲、乙、丙黏性末端是由两种限制性核酸内切酶作用产生的

    B．图乙中的酶切位点在A与G之间

    C．如果甲中的G发生突变，限制性核酸内切酶可能不能识别该切割位点

    D．构建重组DNA分子所用限制性核酸内切酶和DNA连接酶分别作用于a处和b处

     

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    科目：高中生物 来源：2013-2014学年甘肃省高三9月月考生物试卷（解析版） 题型：选择题

    在DNA测序工作中，需要将某些限制性核酸内切酶的限制位点在DNA上定位，使其成为DNA分子中的物理参照点。这项工作叫做“限制性核酸内切酶图谱的构建”。假设有以下一项实验：用限制性核酸内切酶HindⅢ、BamHⅠ和二者的混合物分别降解一个4 kb(1 kb即1000个碱基对)大小的线性DNA分子，降解产物分别进行凝胶电泳，在电场的作用下，降解产物分开，如下图所示。据此分析，这两种限制性核酸内切酶在该DNA分子上的限制位点数目是以下哪一组

    A．HindⅢ1个，BamHⅠ2个

    B．HindⅢ2个，BamHⅠ3个

    C．HindⅢ2个，BamHⅠ1个

    D．HindⅢ和BamHⅠ各2个

     

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