Question

【题目】利用单克隆抗体特异的作用于埃博拉病毒侵染蛋白（VP40蛋白）是一种战胜埃博拉病毒的有效途径。请据图回答：

（1）过程①中选用两种限制酶切割，使目的基因的两端产生不同的黏性末端，这样处理的目的是___________。

（2）图中过程②需要用___________处理大肠杆菌，原因是_____________________。

（3）在基因表达载体中，VP40蛋白基因的首端必须含有___________，其作用是能够被___________识别和结合，从而保证③顺利完成。

（4）为检测VP40基因是否成功表达，可以采用___________技术。VP40蛋白抗体能够战胜埃博拉病毒的原因是______________________。

Answer 1

【答案】 防止目的基因与质粒错误连接（或防止目的基因环化） Ca2+ （CaCl2）处理过的大肠杆菌易于吸收质粒（外源DNA）（或处于感受态） 启动子 RNA聚合酶 抗原-抗体杂交 VP40蛋白抗体与VP40蛋白结合，阻止了埃博拉病侵染细胞

【解析】试题分析：本题考查基因工程、细胞工程，考查对基因工程操作程序、单克隆抗体特点的理解。解答此题，可根据同种限制酶产生的黏性末端可以连接分析用两种限制酶切割目的基因的原因，根据“基因成功表达”的含义判断检测VP40基因是否成功表达的方法。

（1）过程①中选用两种限制酶切割，可以使目的基因的两端产生不同的黏性末端，避免目的基因环化，保证目的基因按一定方向插入到质粒中。

（2）图中过程②用Ca2+处理大肠杆菌，可以增大细胞壁的通透性，使大肠杆菌易于吸收质粒（外源DNA）（或处于感受态），提高转化效率。

（3）基因表达载体中，VP40蛋白基因的首端必须含有启动子，启动子是RNA聚合酶结合位点，可以启动VP40蛋白基因的转录。

（4）检测VP40基因是否成功表达，即检测VP40基因是否控制合成VP40蛋白，可以用VP40蛋白抗体进行抗原—抗体检测。VP40蛋白抗体可以特异性的和埃博拉病毒的VP40蛋白结合，使之凝集成团，失去侵染细胞的能力。