Question

5．图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题：
（1）步骤一中，向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌，可使鸡血细胞破裂．
（2）步骤二中，过滤后收集含有DNA的滤液．
（3）步骤三、四的操作原理是DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，
步骤四通过向溶液中加入蒸馏水调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质．
（4）步骤七：向步骤六过滤后的滤液中，加入等体积的冷却的酒精，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．
（5）步骤七：DNA遇二苯胺试剂，沸水浴5min，冷却后，溶液呈蓝色．

Answer 1

分析 DNA粗提取和鉴定的过程：
（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大．
（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：
动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可．如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜．例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液．
（3）去除滤液中的杂质：
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同．
（4）DNA的析出与鉴定
①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分．
②取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解．然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂．混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝．

解答 解：（1）步骤一中，利用渗透原理，向鸡血细胞液中加入蒸馏水并搅拌，可使鸡血细胞破裂．
（2）步骤二中，过滤后收集含有DNA的滤液．
（3）步骤三、四的操作原理是DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；步骤四通过向溶液中加入蒸馏水调节NaCl溶液的物质的量浓度为0.14mol/L（此时DNA的溶解度最小）时，DNA将会析出，过滤去除溶液中的杂质．
（4）步骤七：向步骤六过滤后的滤液中，加入等体积的冷却的酒精，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．
（5）步骤七：DNA遇二苯胺试剂，沸水浴5min，冷却后，溶液呈蓝色．
故答案为：
（1）蒸馏水
（2）滤液
（3）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同    蒸馏水    0.14    
（4）滤液    酒精     白
（5）二苯胺    蓝

点评 本题考查DNA的粗提取和提纯，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验步骤、实验采用的试剂及试剂的作用等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．