Question

【题目】[生物——选修3，现代生物科技专题]利用基因工程可以治疗有基因缺陷的疾病。基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗，其技术流程如下图：

(1)该项工程中目的基因的获取可以利用PCR技术，依据_________设计引物，利用_______为原料在PCR仪中进行扩增。

(2)该项基因工程的关键环节是需要构建含有Rag2基因的_______________.

(3)图中步骤①中所选的卵母细胞应处于___________期。而ES细胞一般从发育到________时期的

重组胚胎中分离获取。

(4)转化成功的ES细胞具有的结构特点是_______________。为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质，用抗Rag2蛋白的抗体进行________________。

Answer 1

【答案】Rag2基因的核苷酸序列4种脱氧核苷酸表达载体（重组质粒）减数第二次分裂中（MⅡ中）囊胚体积小，细胞核大，核仁明显，且具有目的基因抗原-抗体杂交

【解析】分析题图：图示是利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗的过程图解，其中①表示核移植过程，②表示早期胚胎培养过程，③表示采用基因工程技术将目的基因导入受体细胞。

(1)引物的设计要根据要扩增的DNA序列来设计即Rag2基因的核苷酸序列，利用为4种脱氧核苷酸原料在PCR仪中进行扩增；

(2)该项基因工程的关键环节基因表达载体的构建；

(3) 卵母细胞进入输卵管，并停留在第2次成熟分裂中期，此时染色体都集中在赤道板位置，容易去除染色体，而且此时的细胞才具备受精能力，更容易接收外源染色体，故图中步骤①中所选的卵母细胞应处于MII期。而ES细胞一般从发育到囊胚时期的重组胚胎中分离获取。

(4)转化成功的ES细胞具有的结构特点是体积小，细胞核大，核仁明显，且具有目的基因。基因表达的产物是蛋白质，可用抗原-抗体杂交技术来鉴定。