苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图,图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程.据图回答下列问题:(1)将图1①的DNA用HindⅢ.BamHⅠ完全酶切后.反应管中有4种DNA片段．过程②需要用到DNA连接酶酶．(2)假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

15．

苏云金杆菌（Bt）能产生具有杀虫能力的毒素蛋白．图1是转Bt毒素蛋白基因植物的重组DNA形成过程示意图；图2是毒素蛋白基因进入植物细胞后发生的两种生物大分子合成的过程，据图回答下列问题：
（1）将图1①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后，反应管中有4种DNA片段．过程②需要用到DNA连接酶酶．
（2）假设图1中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ识别位点的碱基序列，现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，则该图1中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割，并能获得所需重组质粒吗？并请说明理由能，切割后露出的黏性末端相同．
（3）若上述假设成立，并成功形成重组质粒，则重组质粒D
A．既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开 B．能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开
C．既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开 D．能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开
（4）图2中α链是mRNA．不同细胞的同一DNA进行过程③时启用的起始点不完全相同（在“都相同”“都不同”“不完全相同”中选择），其原因是不同组织细胞中基因会进行选择性表达
（5）要想检测导入的Bt毒素蛋白基因是否表达，在分子水平上可用抗原-抗体杂交法进行检测，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品．
（6）质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因细胞筛选出来．

分析 1、由于HindⅢ与BamHⅠ两种限制酶酶切形成的黏性末端不一样，图中①中的DNA同时被这两种限制酶切割后产生四种基因片段，即_B、HB、BH、B_ （H表示HindⅢ，B表示BamHⅠ）．
2、图2表示基因的表达，DNA转录形成信使RNA（α链），翻译形成多肽链．

解答解：（1）图中①的DNA含有两个BamHⅠ酶的切割位点，含有一个HindⅢ酶的切割位点，所以用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切①中的DNA后，反应管中有4种DNA片段．过程②中将目的基因与运载体连接起来需要用到DNA连接酶．
（2）由图可知，BamHⅠ和BclⅠ切割DNA后露出的黏性末端相同．因此，质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为限制酶BclⅠ的碱基序列后，用BclⅠ和HindⅢ切割质粒，用BamHⅠ和HindⅢ切割目的基因，仍能获得重组质粒．
（3）质粒和目的基因都被HindⅢ切割，形成相同的黏性末端，则形成的重组质粒还能被HindⅢ切割；质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列，则形成的黏性末端是，而目的基因被BamHⅠ切割，则形成的黏性末端，则形成的重组DNA片段是，不能被BamHⅠ识别和切割．根据酶切位点和识别的碱基序列可知，重组质粒只能被能被HindⅢ切开但不能被BamHⅠ切开．
（4）从图2可知，a链形成是以DNA一条链作为模板进行转录形成的信使RNA分子；不同组织细胞的相同DNA在转录时，如果是相同基因一般转录起点相同，不同的基因转录起点不同，原因是基因的选择性表达．
（5）在分子水平上检测目的基因是否表达可用抗原-抗体杂交法，如果出现杂交带，说明目的基因已经表达蛋白质产品．
（6）质粒上的标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因细胞筛选出来．
故答案为：
（1）4 DNA连接酶
（2）能，切割后露出的黏性末端相同
（3）D
（4）mRNA 不完全相同不同组织细胞中基因会进行选择性表达
（5）抗原-抗体杂交
（6）鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因细胞筛选出来

点评本题以转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图为载体，考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合图中信息准确答题，属于中等难度题．

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B．

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