Question

【题目】下表是某微生物培养基的配方。请分析回答下列问题：

编号	①	②	③	④	⑤
成分	（NH4）2SO4	KH2PO4	FeSO4	CaCl2	H2O
含量	0．4 g	4．0 g	0．5 g	0．5 g	100 mL

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（1）培养基的配方是要根据微生物的营养需求而设定的，从培养基的营养成分看，此培养基可用来培养的微生物同化作用类型是_________。利用该培养基培养微生物时，微生物所需要的碳源来自_____。为防止杂菌污染，常用____________________的方法对培养基灭菌。

（2）若要观察微生物的菌落的特点，培养基中还应添加的成分是_____。鉴定菌种时，可根据菌落的_________（至少答两点）等方面的特征。菌落计数时，一般选取菌落数为_________之间的平板，该方法统计的菌落数量比实际活菌数目少，原因是_____________。

（3）如果在上面的配方中加入一定的纤维素，就可以富集培养_________微生物， 在筛选该菌种的过程中，通常用_____染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对该菌种进行筛选。为了长期保存该菌种，可以采用_____的方法。

Answer 1

【答案】自养型??? 空气中的二氧化碳??? 高压蒸汽灭菌??? 琼脂??? 形状、大小、隆起程度、颜色、透明度??? 30-300??? 统计的一个菌落可能来自两个或两个以上细胞??? 分解纤维素??? 刚果红??? 甘油管藏???

【解析】

培养基为微生物提供生长、繁殖和积累代谢产物的营养物质；营养物质归纳为碳源、氮源、生长因子、无机盐和水；根据化学成分分为合成培养基、天然培养基等根据用途分选择培养基、鉴别培养基；根据性质分为液体、半固体和固体培养基。

（1）据表分析，该培养基的配方中主要的营养物质有氮源硫酸铵、无机盐和水，缺少碳源，所以此培养基可用来培养的微生物同化作用类型是自养型；该培养基培养的微生物的碳源来自于空气中的二氧化碳；对微生物培养基灭菌通常用高压蒸汽灭菌。

（2）微生物的菌落需要在固体培养基的表面生长，因此培养基中需要添加凝固剂—琼脂，使液体培养基凝固成固体培养基；鉴定菌种时，可根据菌落形状、大小、隆起程度、颜色、透明度特征进行鉴定；菌落计数时，常用稀释涂布平板，一般选取菌落数为30-300之间的平板；用该方法统计时，由于一个菌落可能来自两个或两个以上细胞繁殖而成，所以统计的菌落数量往往比活菌的实际数量少。

（3）可以根据微生物对营养物质的需求，选择培养特定的微生物，所以在上面的配方中加入一定的纤维素，就可以富集培养分解纤维素的微生物；通常利用刚果红染色法来筛选纤维素分解菌，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物；长期保存菌种，可以采用甘油管藏的方法，即将菌液转移到甘油中，与甘油充分混合后，放在-20℃的冷藏箱中保存。