Question

如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线．图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamH I、Hind III、Sma I直线所示为三种限制酶的酶切位点．据图回答：

（1）构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割．为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，图中将人乳铁蛋白基因插入载体应选用

 

限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因．筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含

 

的培养基上进行．（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是

 

（填字母代号）．
A．启动子     B．tet^R     C．复制原点    D．amp^R
（3）过程①可采用的操作方法是

 

（填字母代号）．
A．农杆菌转化    B．大肠杆菌转化    C．显微注射    D．细胞融合
（4）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体．这利用了细胞的

 

性．
（5）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用

 

（填字母代号）技术．
A．核酸分子杂交     B．基因序列分析     C．抗原-抗体杂交     D．PCR．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,胚胎移植

专题：

分析：结合题意分析图解：图中质粒包括四环素抗性基因、氨苄青霉素抗性基因、启动子、复制原点，以及两个限制酶切点，并且两个限制酶切点的位置均在四环素抗性基因上；目的基因上有三个限制酶切点，与质粒对照，共有的是BamH I、Hind III．
图中①表示目的基因导入受体细胞，②表示通过胚胎移植的方式将早期胚胎移植到代孕母牛体内．

解答： 解：（1）由图中信息可知，载体上有HindⅢ和BamHⅠ酶切位点，目的基因上也有它们的酶切位点，应用此2种酶切．当人乳铁蛋白基因和质粒连接成重组质粒后，tet^R基因被人乳铁蛋白基因隔开，不是完整的，而amp^R基因是完整的，所以筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要含氨苄青霉素的培养基上进行．
（2）能让目的基因开始表达的是启动子，启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是基因的一个组成部分，控制基因表达（转录）的起始时间和表达的程度．
（3）将目的基因导入到动物中常用显微注射法．
（4）对早期胚胎进行切割，经过程胚胎移植过程可获得多个新个体都发育成了个体，这体现了细胞全能性．
（5）一般检测目的基因是否表达里用抗原-抗体杂交的方法．
故答案为：
（1）BamHI和HindIII    含氨苄青霉素
（2）A 
（3）C
（4）全能性
（5）C

点评：本题难度适中，属于考纲中识记、理解层次的要求，着重考查了基因工程的限制酶的作用特点、启动子的功能、目的基因导入动物细胞的方法等相关知识，要求考生具有一定的识图能力，并能识记相关基础知识．