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    5．回答有关基因工程问题．
    图1显示了某DNA片段的部分碱基序列和长度（bp表示碱基对）以及其中含有的目的基因D．图2表示一种质粒的结构和部分碱基序列．现有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ共4种限制性核酸内切酶，它们识别的碱基序列和酶切位点分别为C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG．
    （1）图1的一条多核苷酸链中，位于相邻两个碱基之间的是D．
    A．氢键                  B．磷酸、脱氧核糖
    C．脱氧核糖              D．脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖
    （2）若用限制酶SmaI完全切割图1的DNA片段，产生的末端是平末端，其产物长度为537bp、790bp、661bp．
    （3）若图2中虚线方框内的碱基对被T-A碱基对替换，那么基因D就突变为基因d．从杂合子中分离出图1及其对应的DNA片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，产物中共有4种不同长度的DNA片段．
    （4）若将图2中质粒和目的基因D通过同种限制酶处理后，再用DNA连接酶进行处理，形成重组质粒，那么应选用的限制酶是BamHI．将重组质粒导入大肠杆菌，为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素B的培养基培养大肠杆菌．经检测，部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达，其最可能的原因是同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向链接．

    分析 分析图1：图中DNA片段含有2个限制酶MspⅠ和SmaⅠ切割位点，也含有两个限制酶BamHⅠ和MboⅠ切割位点．基因D两侧序列为GGATCC，可被限制酶BamHⅠ切割．
    分析图2：质粒含有CCGG序列、GGATCC序列和GATC序列，其中CCGG序列可被限制酶MspⅠ切割，GGATCC序列和GATC序列可被限制酶MboⅠ切割．用限制酶BamHⅠ切割破坏了抗生素A抗性基因，但没有破环抗生素B抗性基因，因此含有重组质粒的大肠杆菌能抗抗生素B，但不能抗抗生素A．

    解答 解：（1）一条脱氧核苷酸链中相邻两个碱基之间依次由脱氧核糖、磷酸、脱氧核糖连接．
    （2）限制酶SmaⅠ的酶切位点是CCC↓GGG，其切割产生的是平末端．图1中DNA片段含有两个SmaⅠ酶切位点，被SmaⅠ酶完全切割后出现三个长度的片段，分别是537bp、790bp、661bp．
    （3）杂合子的基因型为Dd，其中D基因片段有两个SmaⅠ酶切位点，完全切割后出现三个片段长度分别是537bp、790bp、661bp，发生基因突变后的d基因片段只有一个SmaⅠ酶切位点，完全切割后出现两个片段长度分别是1327bp、661bp，所以从杂合子中分离的DNA片段被限制酶SmaⅠ完全切割后形成会四种不同的DNA片段．
    （4）基因表达载体构建的过程中需要利用限制酶和DNA连接酶．限制酶MspⅠ和SmaⅠ的切割位点位于目的基因D上，若用这两种酶切割会被破坏目的基因D；运载体的两个标记基因上都有限制酶MboⅠ的切割位点，用该酶切割会破坏这两个标记基因，因此只能选用限制酶BamHⅠ切割外源DNA分子和运载体．用限制酶BamHⅠ切割质粒会破坏抗生素A抗性基因，但不会破坏抗生素B抗性基因，所以导入重组质粒的大肠杆菌能在含有抗生素B的培养基上生存，因此为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素B的培养基培养．由于同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接，这样会导致部分含有重组质粒的大肠杆菌菌株中目的基因D不能正确表达．
    故答案为：
    （1）D
    （2）平     537bp、790bp、661bp
    （3）4
    （4）DNA连接酶?BamH I     抗生素B    同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向链接

    点评 本题结合基因结构图和运载体结构图，考查基因工程的技术和原理，要求考生认真分析图1和图2，根据图1中信息计算限制酶SmaⅠ切割产生的片段的种类及长度；根据图1和图2中限制酶的给切割位点，明确构建基因表达载体只能用限制酶BamHⅠ，再运用所学的知识答题即可．

    练习册系列答案
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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    16．实验证明，2，4-D（见图1）能够破坏动物的细胞呼吸，破坏染色体；2，4-D使杂草萎蔫后，因杂草细胞中糖分明显升高，使牛羊等牲畜喜食，牛羊胃肠道中的微生物可将2，4-D转化为亚硝酸盐．如图2表示不同2，4-D浓度对农作物和田间杂草生长的影响．

    （1）2，4-D属于人工合成的生长素类似物，构成元素包括C、H、O、Cl；其促进生长的作用是通过促进细胞纵向伸长来实现．
    （2）为确定2，4-D能破坏动物细胞的染色体，可否将适当材料制成装片后，使用光学显微镜直接观察？是（是/否）．
    （3）田间管理时可以使用2，4-D作为除草剂，上图2中表示杂草的曲线为甲（甲或乙）；当残余的2，4-D进入农田附近的自然生态系统后，若仍保持高浓度，则可能导致其抵抗力稳定性下降．
    （4）为验证牛羊胃肠道中的微生物可将2，4-D转化为亚硝酸盐，可在无菌条件下将牛羊胃肠道中的微生物接种到含有一定浓度2，4-D的培养液培养，并定期检测培养液中亚硝酸盐的含量变化．

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    17．图是细胞分裂的示意图．请分析回答：
    （1）处于减数第二次分裂中期的是图C．
    （2）具有同源染色体的是图A和B．
    （3）图A细胞内染色体为4个、染色单体为8个、DNA分子数为8个．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    13．下列关于酶的叙述，正确的是（　　）

    ①图X中②表示酶，①是底物，是酶作用于底物的示意图；
    ②图Y是表示酶粘连失活；
    ③图X、Y、Z表示酶固定的三种方法；
    ④②表示酶，①表示承载物；
    ⑤①表示酶，②表示承载物．
    A．①②B．②④C．③④D．③⑤

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    20．人工选择和自然选择的共同选择方式是（　　）
    A．生物的生存斗争B．人和自然界的选择力量
    C．生物的遗传和变异是普遍存在的D．生物均具有很强的繁殖能力

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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年山西省朔州市高二上期末生物试卷（解析版） 题型：选择题

    （2012秋•徐州期末）制作生态缸时应该遵循一定的原理和要求，下面列举的原理或要求中，合理的是（ ）

    A．生态缸中各种生物之间及生物与无机环境之间，必须能够进行物质循环和能量流动

    B．应该经常向生态缸中通人氧气，从而保证缸中生物的呼吸

    C．生态缸中投放的生物必须有很强的生命力，投放的动物数要多一些

    D．应该将生态缸放在阳光能够直接照射到的地方，以保证获得足够的能量

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    科目：高中生物 来源：2015-2016学年山西省临汾市高二上期中生物试卷（解析版） 题型：综合题

    （2000•广东）如图是胰腺组织局部结构模式图，请据图回答．

    （1）A液为 ，B液为 ，C液为 ，三者共同构成了胰腺组织细胞生活的液体环境，这个液体环境称为 ．

    （2）CO2不从毛细血管进入膜腺组织细胞的原因是 ．

    （3）胰腺组织细胞可分泌胰酶和胰岛素，其中 可进人血液，参与物质代谢的调节，如果该物质分泌不足，可使血液中 浓度升高，导致 病的发生．

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    科目：高中生物 来源： 题型：选择题

    14．噬菌体、古细菌、酵母菌、衣藻都具有的糖是（　　）
    A．纤维素B．淀粉C．糖原D．脱氧核糖

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    科目：高中生物 来源： 题型：解答题

    15．回答下列有关实验设计的问题
    为探究低浓度NaHSO3溶液对水稻光合速率的影响，某研究小组做了如下实验．

    实验报告
    ①材料用具：
    乳熟期的温室盆栽，1mmol/L NaHSO3溶液、蒸馏水、喷壶、光合分析测定仪等．
    ②实验步骤：
    （1）第一步：选取若干株型、长势、叶片均一的水稻植株随机平均分成甲、乙两组，甲组为对照组，乙组为实验组．第二步：每天傍晚分别将等量的蒸馏水、1mmol/LNaHSO3溶液喷洒在甲、乙两组的水稻叶片上，次日上午测定光合速率．③结果与分析：实验结果见图1，经分析可以得出的结论是不同光照强度下低浓度NaHSO3溶液可提高水稻光合速率．
    （2）研究发现NaHSO3增加了叶片内叶绿体形成ATP的能力，推测其作用部位是叶绿体的类囊体．研究小组利用上述条件进一步实验，用0.2?mol/L硫酸甲酯吩嗪（PMS）替代1mmol/LNaHSO3喷洒在甲、乙两组的水稻叶片上，实验结果见图2；用0.2?mol/L硫酸甲酯
    吩嗪（PMS）和1mmol/LNaHSO3混合后喷洒在甲、乙两组的水稻叶片上，实验结果见图3．
    （3）用柱形图绘制出光照强度为1000?mol•m-2•s-1条件下的三组实验结果．
    （4）依据上述实验结果，可以得出的结论是：
    a：证明了0.2?mol/L硫酸甲酯吩嗪（PMS）和1mmol/LNaHSO3效应相同；b：两者共同处理既不存在累加效应，也无抑制效应．．

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