Question

继哺乳动物乳腺生物反应器研发成功后，膀胱生物反应器的研究也取得了一定进展．最近，科学家培育出一种转基因小鼠，其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中．请回答：
（1）将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞，常用方法是

 

．
（2）在基因工程中，将目的基因与运载体结合时必须用

 

酶和

 

酶．常用的运载体有

 

等，而作为运载体必须具备相应的条件，例如应具有

 

以便进行筛选．进行基因转移时，通常要将外源基因转入

 

中，原因是

 

．
（3）通常采用

 

技术检测外源基因是否插入了小鼠的基因组．
（4）在研制膀胱生物反应器时，应使外源基因在小鼠的

 

细胞中特异表达．
（5）为使外源基因在后代长期保持，可将转基因小鼠体细胞的

 

转入

 

细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．该技术称为

 

．
（6）在DNA粗提取实验中，向在溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是
A．有利于溶解DNA        B．于溶解杂质
C．减少DNA的溶解度      D．少杂质的溶解度．

Answer 1

考点：基因工程的原理及技术,DNA的粗提取和鉴定,动物细胞核移植技术

专题：

分析：1、基因工程至少需要三种工具：限制性核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体．其中常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒．作为运载体必须具备的条件：①要具有限制酶的切割位点； ②要有标记基因（如抗性基因），以便于重组后重组子的筛选③能在宿主细胞中稳定存在并复制；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来．
2、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与鉴定．
3、DNA粗提取和鉴定实验中有2次加入蒸馏水，第一次的目的是使细胞吸水胀破，释放DNA；第2次的目的是降低DNA的溶解度，使DNA分子析出．

解答： 解：（1）显微注射法是将目的基因导入受体细胞最有效的方法．
（2）在基因工程中，构建基因表达载体时，首先需用同种限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和运载体，以形成相同的黏性末端，其次需用DNA连接酶将目的基因和运载体连接形成重组DNA分子．基因工程常用的运载体有质粒、动植物病毒、噬菌体等，而作为运载体必须具备相应的条件，例如应具有标记基因以便进行筛选．由于受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达，因此进行基因转移时，通常要将外源基因转入受精卵（或早期胚胎）中．
（3）检测外源基因是否插入了小鼠的基因组通常采用DNA分子杂交技术．
（4）在研制膀胱生物反应器时，应在目的基因前加入膀胱组织特异性表达的启动子，使外源基因在小鼠的膀胱上皮细胞中特异表达．
（5）无性繁殖能保持亲本的遗传特性，因此为使外源基因在后代长期保持，应采用无性繁殖的方法，如核移植技术（克隆），即将转基因小鼠体细胞的细胞核转入去核的卵细胞中构成重组细胞，使其发育成与供体具有相同性状的个体．
（6）在DNA粗提取实验中，向在溶解DNA的NaCl溶液中，不断加入蒸馏水的目的是减少DNA的溶解度，使DNA分子逐渐析出．
故答案为：
（1）显微注射
（2）同种限制酶   DNA连接酶   质粒（或动植物病毒或噬菌体等）   标记基因    受精卵（或早期胚胎）   受精卵（或早期胚胎细胞）具有全能性，可使外源基因在相应组织细胞表达
（3）DNA分子杂交（核酸探针）
（4）膀胱上皮
（5）细胞核   去核的卵    核移植（或克隆）
（6）C

点评：本题综合考查基因工程技术、核移植技术、DNA的粗提取和鉴定，要求考生识记基因工程的原理、使用工具、操作步骤及应用；识记动物细胞核移植技术及应用；识记DNA粗提取和鉴定的原理及操作步骤，能结合所学的知识准确答题．