Question

18．酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用．蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取．为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表．请回答有关问题．

试管编号 项目	I	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸馏水（mL）	2	0	1	1	1	1
缓冲液（mL）	0	X	1	0.5	0.5	0.5
果胶酶液（mL）	0	0	0	0.5	0	0
蜗牛酶液（mL）	0	0	0	0	0.5	0
纤维素酶液（mL）	0	0	0	0	0	0.5
实验结果（绿色深浅程度）	-	-	-	+++	++++	++

（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）
（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是为了使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅．
（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有果胶酶和纤维素酶等多种酶．该实验中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是空白对照组，表中X应填2mL．
（3）用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用等渗溶液洗涤．原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是低渗涨破法．

Answer 1

分析 原生质体是植物细胞去除细胞壁后的结构，而去除细胞壁需用相应的酶（纤维素酶和果胶酶）进行处理．

解答 解：（1）实验过程中，需要轻摇试管，以使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果．
（2）分析实验表格，试管V中加入了蜗牛酶液，绿色最深，说明原生质体从叶小片中游离出来的最多，即该溶液去除细胞壁效果最好，原因是蜗牛以植物为食，唾液中含有果胶酶和纤维素酶．I、Ⅱ、Ⅲ没有添加酶溶液为空白对照组，其目的是排除无关变量的干扰；而添加的溶液的量为无关变量，因此X处应为2ml．
（3）离心后收集沉淀物，并用等渗溶液清洗，目的是保持细胞正常形态．原生质体是否符合要求还需进行检验，其检验的方法是低渗涨破法，即看是否在低渗溶液中会吸水涨破．
故答案为：
（1）为了使细胞壁与酶充分接触，提高酶解效果
（2）蜗牛酶液     果胶酶和纤维素酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ2
（3）等渗溶液        低渗涨破法

点评 本题以图表为载体，考查学生获取和处理信息的能力，分析和解决问题的能力．实验过程中可以变化的因素称为变量．其中人为改变的变量称做自变量，随着自变量的变化而变化的变量称做因变量．除自变量外，实验过程中可能还会存在一些可变因素，对实验结果造成影响，这些变量称为无关变量．要注意无关变量应该相同且适宜．