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【题目】“白菜―甘蓝”是科学家用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种,它具有生长周期短,耐热性强和易储存等优点。下图是“白菜―甘蓝”培育过程示意图,请完成下列问题:

(1)培育成白菜―甘蓝植株,采用的技术手段是__________。该过程应用的原理是____________________

(2)要制备“白菜―甘蓝”的人工种子,要在d步骤选取具有生根发芽能力的_________结构,包裹上人造种皮制得。

(3)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是_________,经此过程产生的细胞类型有__________种。

(4)要获得上图中白菜和甘蓝的原生质体,首先需要分别除去白菜和甘蓝细胞的细胞壁。现提供以下材料和用具:紫色洋葱鳞片叶、适宜浓度的蔗糖溶液、纤维素酶和果胶酶、蒸馏水、镊子、显微镜、载玻片等。在实验过程中要选取适宜浓度的蔗糖溶液而不用蒸馏水的理由是:__________

(5)采用特异性引物对另两种植物花椰菜和黑芥基因组DNA 进行PCR 扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种及纯种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1—4 进行PCR 扩增的结果。据图判断,再生植株1—4 中一定是杂种植株的是__________

【答案】(1)植物体细胞杂交 细胞膜的流动性 细胞的全能性

(2)胚状体

(3)聚乙二醇(PEG)

(4)可防止原生质体过度吸水涨破(保持原生质体正常的形态)(2分)

(5)124 (2 分)

【解析】1)图示培育白菜甘蓝植株的方法是植物体细胞杂交技术,该方法遵循的原理是细胞膜的流动性和细胞的全能性。

2)要制备白菜-甘蓝的人工种子,要在d步骤选取具有生根发芽能力的胚状体结构,包裹上人造种皮制得。

3)在a过程中诱导原生质体融合最常用的诱导剂是聚乙二醇。

4)适宜浓度的蔗糖溶液可防止原生质体过度吸水涨破(或可以保持原生质体正常的形态)。

5)根据图谱,花椰菜含有碱基对为300 600 DNA 片段,黑芥还有碱基对为10001300 1500 的片段,再生植株3,只含有长度为300 600 的片段,与花椰菜一致,124 既含有花椰菜DNA 片段,又含有黑芥DNA 片段,为杂种植株。

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(3)图二是运载体和胰岛素基因的某个片段,已知限制酶I的识别序列和切点是一GGATCC,限制酶II的识别序列和切点是一GATC。Gene和Gene为标记基因,根据图示判断下列有关两者拼接的操作正确的是

A.质粒用限制酶I切割,目的基因用限制酶II切割

B.质粒用限制酶II切割,目的基因用限制酶I切割

C.目的基因和质粒均用限制酶I切割

D.目的基因和质粒均用限制酶II切割

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