Question

【题目】葡萄收获的季节性较强，且不易运输，易腐烂变质，将其加工制作成果汁、果酒、果醋等可解决这个问题。图1是简单的生产流程。请回答下列问题：

（1）果酒的制作离不开酵母菌，若从含有酵母菌、醋酸菌、青霉菌的土壤中分离出较纯的酵母菌，最简便的方法是在_______条件下选择培养，为使酵母菌可以反复利用，可利用______法，将其固定化。

（2）若想对初步筛选得到的酵母菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是_________法。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，在酵母菌的酒精发酵过程中，一般将温度控制在__________。

（3）图2、图3、图4表示酵母菌接种的过程。在图2操作后，等待平板冷却凝固后，应将平板如何放置？_____________。原因是_______________。新配制的培养基可以用______________的方法灭菌，图4培养基上____________(填图中编号）区域出现了单个菌落。

Answer 1

【答案】 无氧 包埋 稀释涂布平板 1825℃ 倒置 防止皿盖上的水珠滴落到培养基上，造成污染 高压蒸汽灭菌 ①

【解析】酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下进行有氧呼吸，在缺氧条件下进行无氧呼吸。果酒的制作原理是利用酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精，20℃左右最适合酵母菌繁殖，发酵时一般将温度控制在18℃～25℃，生产上通常可将酵母菌包埋在海藻酸钠制成的凝胶中制备固定化酵母细胞。分离微生物时需要使用固体培养基进行平板划线法或稀释涂布平板法接种，其中平板划线法操作简单，稀释涂布平板法更易分离单菌落，但操作复杂。微生物培养的关键是防止杂菌污染，因此培养基要进行高压蒸汽灭菌，但对于培养基中有高温易分解的成分，就不能用此方法。微生物培养过程中，在倒平板后需要将培养皿倒置。

（1）果酒的制作原理是利用酵母菌的无氧呼吸产生酒精；生产上通常用海藻酸钠做载体包埋酵母细胞。

（2）稀释涂布平板法既能分离微生物也能对微生物进行计数。20℃左右最适合酵母菌繁殖，酵母菌发酵时一般将温度控制在18℃～25℃。

（3）在涂布平板操作中，平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染。培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌。图3是平板划线分离获得单菌落，根据图示，划线先后顺序是②③①，最容易获得单菌落的是①。