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【题目】单纯疱疹病毒型(HSV-1)可引起水泡性口唇炎。利用杂交瘤技术制备出抗HSV-1的单克隆抗体可快速检测HSV-1。回答下列问题:

1)在制备抗HSV-1的单克隆抗体的过程中要用到___________技术和动物细胞融合技术。

2)制备此单克隆抗体过程中,给小鼠注射一种纯化的HSV-1蛋白相当于___________,使小鼠体内发生体液免疫,产生分泌相应抗体的B淋巴细胞。将该B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合,再用特定选择培养基进行___________检测,最终可获得___________的杂交瘤细胞。

3)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞,体系中出现多种类型细胞的原因是___________

4)若要大量制备抗该蛋白的单克隆抗体,还需对上述杂交瘤细胞进行___________培养和抗体检测,最后将该杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养或注射到小鼠的腹腔内使其增殖,从培养液或小鼠______中提取大量的单克隆抗体。

5)通过上述方法得到的单克隆抗体可准确地识别HSV-1蛋白,其原因是该抗体具有___________等特性。

【答案】动物细胞培养 抗原 筛选 能无限增殖且可产生专一抗体 细胞融合是随机的,且融合率达不到100% 克隆化 腹水 灵敏度高、特异性强

【解析】

根据题干分析,HSV-1蛋白作为抗原引起免疫反应生成抗HSV-1蛋白的抗体,单克隆抗体的制备过程是从小鼠的骨髓中取B细胞,与小鼠的骨髓瘤细胞融合,筛选既能无限增殖又能产生抗体的细胞,植入小鼠腹腔中增殖,从腹水中提取,单克隆抗体具有特异性强和灵敏度高的特点。

1)制备单克隆抗体过程是先效应B细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,接着筛选出能产生抗体的杂交瘤细胞进行体内和体外培养,提取单克隆抗体,则运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养。

2HSV-1蛋白属于抗原,将其注射到小鼠体内会刺激机体发生特异性免疫反应,产生分泌相应抗体的B淋巴细胞,从小鼠的脾脏中获取B淋巴细胞,将该B淋巴细胞与小鼠的骨髓瘤细胞融合,再经过筛选、检测,最终可获得所需的杂交瘤细胞,该细胞具有双亲的特点,即既能在体外培养条件下无限增值,又能产生专一抗体。

3)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有B淋巴细胞相互融合形成的细胞,骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞,原因是:细胞融合是随机的,且融合率达不到100%

4)克隆化培养时,将杂交瘤细胞注射到小鼠的腹腔中(体内培养)或培养基中(体外培养)使其增殖,再从腹水中或培养液中提取、纯化获得大量制备抗该蛋白的单克隆抗体。

5)单克隆抗体可准确地识别这种HSV-I蛋白,其原因是单克隆抗体具有灵敏度高和特异性强等特性。

练习册系列答案
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3)研究发现,如果将胰岛素β链上的第2829位氨基酸调整顺序后,可获得速效胰岛素。该项技术属于__________。要生产该胰岛素,需要定向改造_______(胰岛素基因、胰岛素mRNA或者胰岛素),原因是_________________________________

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1)配制的培养基一般都含有水、无机盐、____________。常采用____________法对培养基进行灭菌,灭菌前需将pH调至________________________

2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板____________(填正置或倒置)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量,采用____________法接种。接种时,实验操作应在酒精灯火焰附近进行的原因是__________________

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