Question

【题目】牛等牲畜的瘤胃中生活着许多以尿素作唯一氮源的微生物。某同学从刚宰杀的牛的瘤胃中取样,获得菌液,并对能分解尿素的细菌进行分离、计数和鉴定。回答下列问题：

（1）为从混杂的菌液中分离菌种，常用 和 方法，在固体培养基上接种，使细菌在固体培养基上形成单个 ，从而获得纯菌株。

（2）为了测定细菌含量，将稀释度为103与104的菌液均按O．lmL的用量，各接种3个平板,在无氧条件培养一段时间后，103的稀释度下平板上长出的菌落数分别为45、56、37，而104的稀释度下平板上长出的菌落数分别为26、14、17，则每升菌液的活菌数约为 。与活菌的实际数目相比，该方法测得的结果往往偏低，主要原因是 。

（3）为了鉴定该菌种,在以尿素为唯一氮源的培养基需添加 作指示剂，目的菌在生长过程中会产生 酶，催化尿素分解并产生NH3,使pH升高,指示剂变红。

Answer 1

【答案】（1）平板划线法 稀释涂布平板法 菌落

（2）4．6×108个 两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

（3）酚红 腺

【解析】（1）分离微生物的常用方法有平板划线法和稀释涂布平板法。两种方法的目的都是使细菌在固体培养基上形成单个菌落，从而获得纯菌株。

（2）104的稀释度下，三个平板上的菌落数都小于30，说明实验过程出现问题。因此该菌落数用稀释度为103来计算。（45+56+37）÷3÷0．1×1000=4．6×105个，每升水样中的活菌数为4．6×105×103=4．6×108．该方法测得的结果往往偏低，主要原因是两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

（3）尿素分解菌可以产生脲酶将尿素分解分解为氨，使pH升高，培养基中进入酚红指示剂后，氨可以使指示剂呈红色，据此可以用酚红指示剂鉴别尿素分解菌．