Question

5．已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶，脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产，回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂会被苏丹Ⅲ染成橘黄色，微生物A产生的油脂不易挥发，可选用萃取法（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取．
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以油脂（或脂肪）为唯一碳源的固体培养基进行培养，从功能上划分该培养基属于选择培养基．
（3）若要测定培养液中微生物B的活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数，与实际的活菌数目相比，计数结果往往偏小（填“偏大”、“相同”、“偏小”）．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实．

Answer 1

分析 1、微生物常见的接种的方法
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落．
2、植物有效成分的提取可用蒸馏法、压榨法或萃取法，因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取．

解答 解：（1）脂肪可被苏丹Ⅲ染成橘黄色，故显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用苏丹Ⅲ染色．因为植物油不挥发，所以不适合采用蒸馏法提取，应用压榨法或萃取法提取．
（2）筛选产脂肪酶的微生物B时，应该使用只有目的菌能够生存的，其他微生物不能生存的选择培养基，培养基中应该添加油脂作为唯一碳源．从功能上划分该培养基属于选择性培养基．
（3）若要测定培养液中微生物B的活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数．当两个或多个细菌集合在一起时，只能长成一个菌落，因此与实际的活菌数目相比，计数结果往往偏小．
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，45℃条件下该酶活力最小，该酶的最适温度为40℃左右，为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕40℃设计后续实验．
故答案为：
（1）橘黄    萃取法
（2）油脂 （或脂肪）  选择
（3）稀释涂布平板   偏小
（4）45    40

点评 本题考查了微生物的分离与培养以及植物有效成分的提取的有关知识，意在强化学生对相关提取方法的理解和运用，提高相关实验技能．