Question

6．在“DNA的粗提取和鉴定”实验中，发现DNA提取量不足．下列有关原因分析不正确的是（　　）

• A． 经蒸馏水处理的红细胞用玻璃棒搅拌的时间过短
• B． 溶解时所调制的NaCl溶液浓度未达到2mol/L
• C． DNA再溶解时，玻璃棒搅拌方向是单向的
• D． 向2mol/LNaCl溶液中加入蒸馏水太少

Answer 1

分析 1、DNA粗提取和鉴定的原理：
（1）DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精；DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性．
（2）DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色．
2、DNA粗提取和鉴定的过程：
（1）实验材料的选取：凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但是使用DNA含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大．
（2）破碎细胞，获取含DNA的滤液：
动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可．如果实验材料是植物细胞，需要先用洗涤剂溶解细胞膜．例如，提取洋葱的DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液．
（3）去除滤液中的杂质：
方案一的原理是DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同；方案二的原理是蛋白酶分解蛋白质，不分解DNA；方案三的原理是蛋白质和DNA的变性温度不同．
方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离．
（4）DNA的析出与鉴定
①将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等、冷却的酒精溶液，静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA．用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分．
②取两支20ml的试管，各加入物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解．然后，向两支试管中各加入4ml的二苯胺试剂．混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝．

解答 解：A、经蒸馏水处理的红细胞用玻璃棒搅拌的时间过短，部分细胞还未破裂，这会造成DNA的提取量不足，A正确；
B、NaCl溶液浓度在0.14～2mol/L时，随着NaCl溶液浓度的升高，DNA的溶解度越大，因此溶解时所调制的NaCl溶液浓度未达到2mol/L时，部分DNA还没有溶解，这会造成DNA的提取量不足，B正确；
C、DNA再溶解时，玻璃棒应该沿着一个方向缓慢搅拌，这不会造成DNA提取量不足，C错误；
D、向2mol/LNaCl溶液中加入蒸馏水的目的是稀释溶液，使DNA析出，若加入蒸馏水的量太少，稀释度不够，这会造成DNA的提取量不足，D正确．
故选：C．

点评 本题考查DNA的粗提取和鉴定，对于此类试题，需要考生注意的细节较多，如实验的原理、实验采用的方法、实验现象等，需要考生在平时的学习过程中注意积累．