苦马豆素(SW)最早是从植物灰苦马豆中分离获得.为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用.许多学者做了大量研究.请根据以下实验研究过程及研究结果回答问题．①取小鼠肝癌Hepal-6细胞②制成单细胞悬液.接种于多孔板.加入等量培养液.每组设5个平行孔③于37℃.5%CO2培养箱中分别培养24h④加入等量不同浓度SW溶液.于37℃.5%CO2培养箱中分别培养⑤分� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

苦马豆素（SW）最早是从植物灰苦马豆中分离获得，为了研究SW是否具有抑制肿瘤细胞生长的作用，许多学者做了大量研究，请根据以下实验研究过程及研究结果回答问题．
①取小鼠肝癌Hepal-6细胞
②制成单细胞悬液，接种于多孔板，加入等量培养液，每组设5个平行孔
③于37℃、5%CO₂培养箱中分别培养24h
④加入等量不同浓度SW溶液，于37℃、5%CO₂培养箱中分别培养
⑤分别在24h、48h、72h时吸取培养液，观察结果，得到不同浓度SW对细胞存活率影响曲线（图1）
⑥将培养48h的培养液离心，细胞染色，在荧光显微镜下观察拍照，记录正常细胞和凋亡细胞数目，并采用免疫荧光细胞技术检测细胞凋亡蛋白Bax和Bcl-2表达量状况，汇总统计结果（表1）
（1）实验中首先将小鼠肝癌Hepal-6细胞制成单细胞悬液，于37℃、5%CO₂培养箱中培养的目的是

．
（2）实验中对照组的处理方法应为

，利用多孔板培养时，每组设置5个平行孔同时进行培养，计数后统计平均值是为了

．
（3）分析图1中曲线可知，SW对肝癌Hepal-6细胞作用效果的特点是：

SW（μg/mL）	癌细胞数目	凋亡细胞数目	Bax蛋白	Bcl-2蛋白
2	+	++++	++++	+
1	++	+++	+++	++
0.5	+++	++	++	+++
0	++++	+	+	++++

表1培养48h细胞数目及凋亡蛋白Bax和Bcl-2的表达量情况（注：“+”的数量表示相对值的大小）
①

；
②

．
（4）表1结果说明SW可以诱发细胞

，从分子水平上分析，SW可以导致癌细胞内

的合成量增加，该基因表达的过程可以表示为

．

考点：动物体细胞克隆

专题：

分析：分析表格：随着SW浓度的增加，癌变的细胞减少，凋亡的细胞增多，可以得出SW可以诱导细胞凋亡；同时，可以看出Bax蛋白随着SW浓度增加而增加，Bcl-2蛋白着SW浓度增加而减少．
分析曲线图：SW浓度越高，对细胞生长（存活）的抑制作用越强；SW作用时间越长，对细胞生长（存活）的抑制作用越强．

解答： 解：（1）动物细胞培养，制成单个细胞，防止接触抑制，给予适宜的环境，使细胞克隆（细胞分裂、细胞增殖），为科研提供足够的材料．
（2）空白对照，不加SW，多组测量为减小误差使实验结果更可信．
（3）相同作用时间，不同SW浓度对小鼠肝癌Hepal-6细胞有抑制，且随着SW浓度增加，抑制作用增强；同一SW浓度，不同作用时间对对小鼠肝癌Hepal-6细胞有抑制，且随着SW作用时间增加，抑制作用增强．
（4）分析曲线图可知：SW浓度越高，对细胞生长（存活）的抑制作用越强；SW作用时间越长，对细胞生长（存活）的抑制作用越强．Bax基因表达的过程可以表示为Bax基因转录形成mRNA，mRNA翻译成Bax蛋白，如图：

．
故答案：（1）细胞克隆（细胞分裂、细胞增殖）
（2）不加SW药物（或只加入等量的生理盐水）减小误差使实验结果更可信
（3）①SW浓度越高，对细胞生长（存活）的抑制作用越强
②SW作用时间越长，对细胞生长（存活）的抑制作用越强
（4）凋亡 Bax蛋白

点评：本题结合图表，考查动物的细胞培养与体细胞克隆，意在考查考生具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，具备验证简单生物学事实的能力，并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理．

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