Question

【题目】下图是利用生物工程技术生产人生长激素的示意图。质粒上的Ampr表示青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因，限制酶PstI、EcoR I和Hind Ⅲ切割形成的末端均不相同。据图回答：

（1）将人生长激素基因导入小鼠体内来生产生长激素。图中对供体雌鼠甲用促性腺激素处理一段时间后与雄鼠乙交配，然后通过手术的方法从雌鼠甲的______中取出受精卵。

（2）①过程不能利用人的皮肤细胞，其原因是______________________________________。②过程是在____________酶的催化下，以__________________为原料合成相应产物。

（3）从该生产过程看，为了使目的基因和质粒定向连接并且有利于受体细胞的筛选，切割质粒时应选用的酶是____________。

（4）大肠杆菌细胞内应不含____________基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。

（5）如果从限制酶Pst I、EcoR I和HindⅢ任选两种酶对质粒进行切割，均会将质粒切成两段，则形成的DNA片段有______种，其中含有完整四环素抗性基因的DNA片段占______。

Answer 1

【答案】输卵管基因的选择性表达（或皮肤细胞不能合成生长激素的mRNA）逆转录酶脱氧核苷酸Pst I酶和EcoR I酶标记（青霉素抗性基因(Ampr)和四环素抗性(Tetr) ）61/6

【解析】

（1）精子和卵细胞在输卵管中受精形成受精卵，所以可以通过手术从雌鼠甲的输卵管中取出受精卵，待受精卵发育到桑葚胚或囊胚时，才可以进行胚胎移植。
（2）由于基因表达具有选择性，人生长激素基因只在垂体细胞中表达产生相应的mRNA和生长激素，所以①过程不能利用人的皮肤细胞。②过程是逆转录过程，需要在逆转录酶的催化下，以脱氧核苷酸为原料合成相应产物。
（3）根据题意和图示分析可知：破坏的是青霉素抗性基因，所以用限制酶PstI，而且要保证目的基因和质粒定向连接，所以不能形成相同的黏性末端，故另一种酶选EcoRI酶。
（4）大肠杆菌细胞内应不含Ampr和Tetr基因，以利于筛选出含重组质粒的受体菌。
（5）用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ进行切割，只有任意两个位点被切断且每次机会相等，任意两种酶切割会形成2个DNA片段，所以切割三次共有6个片段且这些片段不等，既得到6种．只有同时用PstI酶和FcoRI酶切割时会得到一个完整四环素抗性基因的DNA片段，故概率为1/6。