Question

常见的酿酒酵母只能利用葡萄糖而不能利用木糖，自然界中一些酵母菌能分解木糖产生酒精但对酒精的耐受能力较差。下面是利用木糖发酵产生酒精的酿酒酵母的培育过程，请分析回答下列问题：

（1）将自然界中采集到的葡萄带回实验室，用________将葡萄皮上的微生物冲洗到无菌的三角瓶中，瓶中的液体经适当稀释后，接种于固体培养基上，在适宜的条件下培养，获得各种菌落。

（2）将培养基上的酵母菌菌株转接到以木糖为唯一碳源的培养基中，无氧条件下培养一周后，有些酵母菌死亡，说明这些酵母菌________。从存活的酵母菌提取DNA，从中获取目的基因并用PCR技术大量扩增。这里目的基因是指控制________合成的基因

（3）将目的基因连接到一种穿梭质粒上。该质粒既含有大肠杆菌的复制起点pMB1ori，也含有酵母菌复制起点ARS，还具有两种标记基因，即氨苄青霉素抗性基因和尿嘧啶合成酶基因。你认为这种质粒的特点是________。

（4）大肠杆菌被该质粒转化后，应接种于含________的培养基上进行筛选。将质粒导入酵母菌时，由于氨苄青霉素不能抑制酵母菌繁殖，应选择缺乏________能力的酿酒酵母作为受体菌。

（5）对转基因酿酒酵母发酵能力进行测试，结果如右图所示，据图分析，将转基因酿酒酵母接种在________为碳源的培养基中进行发酵能力测试，最初培养基中的葡萄糖被快速消耗，随着发酵继续进行，酿酒酵母能够________，说明所需菌株培育成功。

Answer 1

答案：
解析：

（1）无菌水 　　（2）不能利用木糖发酵（或缺乏木糖发酵途径）　木糖发酵有关的酶 　　（3）既可在大肠杆菌细胞中复制，也可在酿酒酵母细胞中复制 　　（4）氨苄青霉素　尿嘧啶合成 　　（5）葡萄糖和木糖　利用木糖产生酒精，并且酒精浓度升高对木糖发酵无明显影响