Question

请回答下列有关细胞和分子生物学技术的问题：
（1）DNA粗提取的实验原理是：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在

 

mol/L的NaCl溶液中的最低；鉴定DNA所用的试剂是

 

，沸水浴加热呈

 

色；实验中使用酒精的目的是

 

；实验过程中两次用到蒸馏水，第一次目的是使成熟的鸡血红细胞涨破释放出DNA，第二次目的是

 

．
（2）PCR技术的中文全称是

 

，在操作过程中需要添加引物，它的化学本质是

 

．反应过程中控制不同温度的意义是不同的：90℃以上时

 

，双链DNA解聚为单链；50℃左右时

 

，引物与两条单链DNA结合； 72℃左右时延伸，Taq DNA聚合酶有最大活性，使DNA新链沿着

 

方向延伸．
（3）血红蛋白的提取和分离试验中，分离纯化常用的方法有凝胶色谱法和电泳法，前者的原理是

 

，后者的原理是

 

，在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是

 

．

Answer 1

考点：DNA的粗提取和鉴定,蛋白质的提取和分离,PCR技术的基本操作和应用

专题：

分析：1、DNA的粗提取与鉴定的实验原理：①DNA在氯化钠溶液中的溶解度，是随着氯化钠的浓度变化而改变的．当氯化钠的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低．利用这一原理，可以使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出；②DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液．利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA；③洗涤剂能瓦解细胞膜但是对DNA没有影响；④蛋白质不能耐受较高温度，在80℃条件下会变性，而DNA对温度的耐受性较高；⑤蛋白酶能水解蛋白质，而对DNA没有影响；⑥DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂．
2、PCR（聚合酶链式反应）是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链，低温（经常是60°C左右）时引物与单链按碱基互补配对的原则结合，再调节温度至DNA聚合酶最适反应温度（72°C左右），DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖（5'-3'）的方向合成互补链．基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备，能在变性温度，复性温度，延伸温度之间很好地进行控制．
3、用凝胶色谱法分离蛋白质的原理是蛋白质分子量大小不同导致有些蛋白质能进入凝胶颗粒，另一些不能，所以迁移速度不同，将分子量不同的蛋白质分离，电泳的原理是利用带电粒子在电场中移动速度不同而达到分离的目的．

解答： 解：（1）DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，在0.14mol/L的NaCl溶液中的最低；DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂；
DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的蛋白质等某些物质则可以溶于酒精溶液，利用酒精可以除去溶于酒精的蛋白质等物质获取较纯净的DNA；实验过程中两次用到蒸馏水，第二次加蒸馏水的目的是稀释氯化钠溶液的浓度，使DNA析出．
（2）PCR技术的中文全称是多聚酶链式反应；引物的本质是DNA或RNA；反应过程中控制不同温度的意义是不同的：90℃以上时DNA变性形成单链，50℃左右时，单链DNA与引物结合，叫复性，72℃左右时延伸，DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖（5'-3'）的方向合成互补链．
（3）血红蛋白的提取和分离试验中，凝胶色谱法分离蛋白质的原理是根据相对分子质量的大小分离蛋白质，电泳法分离和纯化蛋白质的原理是各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同；在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能．
故答案为：
（1）0.14   二苯胺   蓝    除去溶于酒精的蛋白质      稀释NaCl溶液
（2）多聚酶链式反应    DNA或RNA    变性    复制     5′端向3′端
（3）根据相对分子质量的大小分离蛋白质      各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同     让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能

点评：对于DNA粗提取与鉴定实验、PCR技术实验、血红蛋白的提取和分离实验的掌握是本题考查的重点．