Question

【题目】下图为某种哺乳动物体细胞核移植过程图。回答下列问题。

（1）①处需要用_______________等处理，然后分瓶继续培养；细胞培养需要O2和CO2，CO2的主要作用是______________________。

（2）卵母细胞在体外培养到____________________时进行去核。与去核卵母细胞融合的供体细胞培养一般不会超过10代，原因是________________________。激活受体细胞除了用电刺激的方法外，还可以用 ______________________________________。（写一种实际方法）

（3）动物细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植的原因是_______________________ 。

Answer 1

【答案】 胰蛋白酶 维持培养液的pH 减数第二次分裂中期 保持细胞正常的二倍体核型 钙离子载体（或乙醇、蛋白酶合成抑制剂等） 动物胚胎的细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难

【解析】试题分析：据题图科可知，图示为转基因克隆奶牛的培育过程，该过程采用了动物细胞培养技术、动物体核移植技术、早期胚胎培养技术、胚胎移植技术。

（1）贴面瓶壁的细胞需要用胰蛋白酶等处理，然后分瓶培养，让细胞继续增殖；在培养过程中，将成动物细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是维持培养基（液）的pH。

（2）由于减数第二次分裂中期的卵母细胞核的位置靠近第一极体，用微型吸管可一并吸出细胞核与第一极体；细胞一般传至10代后就不易传下去，一般来说，细胞在传至10至50代左右，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化，与去核卵母细胞融合的供体细胞培养一般不会超过10代，原因是保持细胞正常的二倍体核型 。用物理或化学方法可以激活受体细胞，使其完成细胞分裂和发育进程，具体的方法有电脉冲、钙离子载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等。
（3）动物胚胎的细胞分化程度低，恢复其全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，因此，动物细胞核移植的难度高于胚胎细胞核移植。