Question

4．番茄叶片受害虫损伤后，叶肉细胞迅速合成蛋白酶抑制剂，抑制害虫的消化作用．人们尝试将番茄的蛋白酶抑制剂基因导入玉米，以对付猖獗的玉米螟．如图为培育转基因抗虫玉米的流程图．下列描述正确的是（　　）

• A． 可利用限制性核酸内切酶从番茄的基因库中获取蛋白酶抑制剂基因
• B． 用氯化钙处理玉米受体细胞，有利于含目的基因的重组质粒导入
• C． 重组Ti质粒应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以启动蛋白酶抑制剂基因的转录
• D． 若将目的基因导入玉米花粉细胞，通过花药离体培养可获得稳定遗传的转基因玉米

Answer 1

分析 基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．

解答 解：A、可利用限制性核酸内切酶从番茄的叶肉细胞中获取蛋白酶抑制剂基因，A错误；
B、将番茄的蛋白酶抑制基因转入玉米细胞时，最常采用的方法是农杆菌转化法，氯化钙用于处理微生物，B错误；
C、重组Ti质粒应有RNA聚合酶识别和结合的部位，即启动子，以启动蛋白酶抑制剂基因的转录，C正确；
D、若将目的基因导入玉米花粉细胞，通过花药离体培养和秋水仙素处理可获得稳定遗传的转基因玉米，D错误．
故选：C．

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具和操作步骤，掌握各操作步骤的相关细节，能结合所学的知识准确答题．