Question

【题目】炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病。对炭疽病疑似患者，可通过图1所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊。表1是培养炭疽杆菌的血琼脂培养基成分，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌。

蛋白胨	10g
牛肉膏（粉）	3g
氯化钠	5g
脱纤维养血（含多种生长因子）	50mL
琼脂	15g
去离子水	1000mL

（1）表分析“血琼脂培养基”属于_______________（多选）

①通用培养基②选择培养基③固体培养基④液体培养基

（2）由表可知，微生物生长所需的营养物质有__________________________________。

为从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后取0.1ml滴于培养基表面，用无菌涂布器（玻璃刮铲）涂匀，这种接种方法称为 ____________。图2所示的四种菌落分布图中，不可能由该方法得到的是_________________________。

（3）制备图1中的液体培养基时需采取 _________方法灭菌，目的是_____________。

装桶时不要装的太挤，以免______________________________。

（4）据图1分析，接种可疑菌后，经35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是________________。对照组试管中应加入________________，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组_____（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。此实验依据的原理是_____________________________。

（5）对排除的疑似患者及易感人群，可采取的最有效的预防措施是___________________。

Answer 1

【答案】 ①③ 碳源、氮源、水、无机盐（和生长因子） 稀释涂布平板法 D 高压蒸汽灭菌 杀死细菌及芽孢 妨碍蒸汽流通影响灭菌效果 炭疽杆菌大量繁殖 等量生理盐水 低 实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清 接种（炭疽杆菌）疫苗

【解析】分析：培养基的基本成分:水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子。无菌操作包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌。微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。微生物实验室分离中配制培养基的操作步骤：计算→称量→溶解→调pH→灭菌步骤。培养基的分类有按物理性质分有固体、半固体、液体培养基；按用途分为选择培养基和鉴别培养基。

（1）根据表格分析，该培养基含有牛肉膏、蛋白胨，是细菌的通用培养基，又因为含有琼脂，为固体培养基。故选①③。

（2）由表可知，微生物生长所需的基本营养物质有四类：碳源、氮源、水、无机盐（部分微生物需要特定的生长因子）。稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分布涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。由图中四种菌落分布情况可知，A、B和C是采用稀释涂布平板法得到的，而D是采用平板划线法得到的。

（3）制备图1中的液体培养基时应该用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，以杀死微生物及芽孢。装桶时不要装的太挤，以免妨碍蒸汽流通影响灭菌效果。

（4）接种可疑菌后，经35℃培养24小时，若液体培养基变浑浊，则可能就是炭疽杆菌大量繁殖。对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。此实验根据的原理是实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清。

（5）对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体和记忆细胞而获得没免疫能力。