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河北农科院的科学家通过基因工程培育抗虫棉时,需要从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因,放入棉花的细胞中与棉花的DNA结合起来并发挥作用,请回答下列有关问题:

1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是????????????????????? ,此工具主要存在于??????????????? 中,其特点是?????????????????????????????????????

2)苏云金芽孢杆菌一个DNA分子上有许多基因,获得抗虫基因常采用的方法是???????????????????? 。具体做法是:用限制性核酸内切酶将苏云金芽孢杆菌的DNA切成许多片段,然后将这些片段????????????????????????????????????? ,再通过运载体转入不同的受体细胞,让它们在各个受体细胞中大量复制,从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把???????????????????????????? 分离出来。

3)进行基因工程操作一般要经过的四个步骤依次是???????????????????????????

????????????????????????? ???????????????????????? ?????????????????????

 

【答案】

1)限制性核酸内切酶?? 微生物???? 能识别特定的脱氧核苷酸序列并在特定位点切断DNA

2)鸟枪法????? 分别与运载体结合?????? 带有目的基因的DNA片段

3)提取目的基因    目的基因与运载体结合   将目的基因导入受体细胞 ?? 目的基因的检测和表达

【解析】1)限制性核酸内切酶是一种限能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子,一般存在于微生物中。

2鸟枪法是一种由生物基因组提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超声波等)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段,继而将这些片段与适当的载体结合,将重组DNA转入受体菌扩增,获得无性繁殖的基因文库,再结合筛选方法,从众多的转化子菌株中选出含有某一基因的菌株,从中将重组的DNA分离、回收。

3)基因工程的四个步骤:目的基因获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞的方法、目的基因的检测与鉴定。

 

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科目:高中生物 来源: 题型:

研究发现:端粒在不同物种细胞中对于保持染色体稳定性和细胞活性有重要作用,端粒酶是一种逆转录酶,能延长缩短的端粒(缩短的端粒其细胞复制能力受限),从而增强体外细胞的增殖能力。端粒酶在正常人体组织中的活性被抑制,在肿瘤中被重新激活,端粒酶可能参与恶性转化。科学家通过探究DNA载体途径的RNA干扰技术抑制端粒酶的活性,从而抑制肿瘤细胞生长增殖以寻找一种抑制肿瘤细胞的新途径。

  方法思路:

  ①构建干扰质粒          (插入针对人体端粒酶逆转录酶亚基(hTERT)的mRNA的干扰序列)和对照质粒PSG—CTR(插入不针对人体任何mRNA序列的对照组序列)。

  ②将空质粒PSG(不含目的基因)、干扰质粒和对照质粒分别感染肝癌细胞。

 












③一段时间后观察检测细胞的               。计算细胞凋亡率,绘制肝癌细胞生长曲线。结果如下图:

 

请回答:

  (1)完成实验步骤中的空格:

    ①            ;②           

  (2)在构建质粒时,要将质粒导入大肠杆菌细胞并用        培养基进行筛选鉴定,然后再提取。因此,在构建的表达载体质粒上必须含有       

  (3)端粒酶可以通过以自身的      为模板,          为原料来合成端粒DNA。

(4)根据题意请分析实验结果并得出结论。

                                       

                                      

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科目:高中生物 来源:2011届江苏省无锡市高三上学期期末考试生物试卷 题型:综合题

英国科学家Sanger因发明了链终止DNA测序法而获诺贝尔奖。其主要内容步骤是:先向DNA复制体系中加入能够终止新链延伸的某种脱氧核苷酸类似物,以得到各种不同长度的脱氧核苷酸链;再通过电泳呈带(按分子量大小排列),从而读出对应碱基的位置(如下图)。请分析回答:

(1)若在活细胞内发生图中“加热变性”的结果,必需有            的参与。
(2)假设一模板链中含N个腺嘌呤脱氧核苷酸,通过上述操作能得到        种长度不同的脱氧核苷酸链。
(3)所得到的各种长度不同的脱氧核苷酸链之所以能通过电泳而分离开来,主要是依据它们的                         差异。
(4)若用上述测序方法读出碱基G的位置,则必须加入带标记的           类似物。
(5)采用上述链终止法测定某一双链DNA中的全部碱基排序,你认为至少要按图中所示模式操作                       次。

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科目:高中生物 来源:2013届海南省琼海市嘉积中学高三下学期第一次月考生物试卷(带解析) 题型:综合题

(1)降钙素是一种多肽类激素,临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低,半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素,从预期新型降钙素的功能出发,推测相应的脱氧核苷酸序列,并人工合成了两条72个碱基的DNA单链,两条链通过18个碱基对形成部分双链DNA片段,再利用Klenow酶补平,获得双链DNA,过程如下图所示。在此过程中发现,合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题:

①上述制备该新型降钙素,运用的现代生物工程技术是               
②Klenow酶是一种           酶,合成的双链DNA有           个碱基对。
③获得的双链DNA经EcoRⅠ(识别序列和切割位点-GAATTC-)和BamHⅠ(识别序列和切割位点-GGATCC-)双酶切后插入到大肠杆菌质粒中,筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行DNA测序验证。
A:设计EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切的目的是                                             
B:要进行重组质粒的鉴定和选择,需要大肠杆菌质粒中含有           
④经DNA测序表明,最初获得的多个重组质粒,均未发现完全正确的基因序列,最可能的原因是                                            
(2)科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛,如果要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆(如下图所示),请结合图示回答下列问题。

①在进行细胞培养时,要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分离,形成单个细胞,这个过程中需要利用________酶处理。
②形成重组细胞时应选用________期的卵母细胞,并去掉其细胞核的原因是____________
__________________________________。
③如果重组细胞为贴附性细胞,则在进行原代培养时,会表现出_______和________等特点。
④在胚胎移植技术的基本程序中,冲卵以后,要对胚胎进行质量检查,此时的胚胎应该发育到         或者囊胚阶段。
⑤上图中所示的生物技术包括有核移植、________、________等。转基因奶牛的克隆成功,说明了动物________具有全能性。

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科目:高中生物 来源:2012-2013学年浙江省高三第一次统练生物试卷(解析版) 题型:综合题

(11分)1990年,在经过了长期的审查后,美国NIH(美国国立卫生研究所)终于批准了对一名患有严重复合型免疫缺陷症的4岁女孩实施基因治疗。腺苷酸脱氨酶是免疫系统完成正常功能必需的酶,临床患者先天腺苷酸脱氨酶(ada)基因缺乏,导致她患重症联合免疫缺陷病(SCID)。因此,她不能抵抗任何微生物的感染,只能在无菌条件下生活。运用现代生物技术进行治疗后,患者的免疫功能得到了很大的修复。下图表示治疗SCID的过程,请据图回答下列问题

(1)在这个实例中充当“分子运输车”的是________,目的基因是________,目的基因的受体细胞是________。

(2)要获得携带人正常ada基因的细菌,需要的工具包括________、 ________、______

(3)人的ada基因与胰岛素基因相比,其主要差别是________。

(4)如果科学家通过基因工程技术,成功改造了某女性血友病患者的造血干细胞,使其凝血功能全部恢复正常。写出该女性的卵原细胞在治疗前后的基因型:(正常基因为H,血友病基因为h)________ 、________ 。

(5)如果该女性在恢复正常后,与一正常男性结婚,所生子女的表现型为________ (在下列选项中选择正确的一项),并说明理由:________________________。

A.子、女儿全部正常

B.儿子、女儿中各一半正常

C.儿子全部患病、女儿全部正常

D.儿子全部正常、女儿全部患病

 

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