Question

【题目】下图是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内，制备“工程菌”的示意图。

据图回答：

(1)获得A有两条途径：一是以A的mRNA为模板，在_______酶的催化下，合成互补的单链DNA，然后在______的作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；二是根据目标蛋白质的______________序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测其DNA的_________________序列，再通过化学方法合成所需基因。

(2)利用PCR技术扩增基因A时，需要在反应体系中添加的有机物质有______、_______、4种脱氧核糖核苷三磷酸和耐热性的DNA聚合酶，扩增过程可以在PCR扩增仪中完成。

(3)由A和载体B拼接形成的C通常称为___________________________。

(4)在基因工程中，常用Ca2+处理D，其目的是________________________________________。

Answer 1

【答案】 逆转录 DNA聚合酶 氨基酸 脱氧核苷酸 引物 模板(A基因) 基因表达载体 使其成为感受态细胞，有利于吸收重组DNA分子

【解析】试题分析：本题主要考查基因工程。要求学生熟知目的基因的获取方法、PCR技术、基因表达载体的构建方法、将目的基因导入受体细胞的方法。

（1）利用逆转录法合成目的基因的过程是：以mRNA为模板，在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA，然后在DNA聚合酶作用下，合成双链DNA分子；根据蛋白质工程合成目的基因的过程是：根据目标蛋白质的氨基酸序列，推测相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测DNA中脱氧核苷酸的排列顺序，通过化学方法合成。
（2）PCR过程中需要耐热性的DNA聚合酶（连接磷酸二酯键）、模板A基因（DNA复制的模板）、引物（作为复制的起点）和4种脱氧核糖核苷酸（提供原料和能量）等条件。
（3）目的基因A和运载体B结合，形成基因表达载体。
（4）在利用大肠杆菌做受体细胞时，需要先用Ca2+处理，使之成为感受态细胞，有利于其吸收重组DNA分子。