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    基因工程操作的基本步骤，正确的顺序是（1）使目的基因与运载体结合（2）将目的基因导入受体细胞（3）目的基因的检测与表达（4）提取目的基因


    1. A.
      （4）（1）（2）（3）
    2. B.
      （3）（2）（4）（1）
    3. C.
      （4）（2）（1）（3）
    4. D.
      （3）（4）（1）（2）
    A
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    科目：高中生物 来源： 题型：

    35.（7分）棉铃虫是一种危害棉花的害虫。我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害。通过基因工程方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并成功表达，棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，进而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚细胞，最终形成含有目的基因的种胚。此种方法的优点是操作简便，省去了组培的复杂过程。

    （1）利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因操作的基本步骤中的第三步，即                  。构建基因表达载体时要把目的基因整合到Ti质粒的T-DNA上，其原因是                    。

    （2）基因工程的工具酶可以将目的基因切下并连接到运载体上。限制酶可以识别特定的DNA序列，并切断         键。下列所示的黏性末端是由         种限制酶作用产生的。

    （3）用标记的特异性抗体可以直接检测毒蛋白，这种检测方法称为                 。

    也可在宏观性状水平检测该目的基因是否表达，方法是                  。已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体，使细胞膜穿孔，肠细胞裂解，昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小，原因是人类肠上皮细胞                 。

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    科目：高中生物 来源：2010年河南省师大附中高二下学期期中考试生物卷 题型：综合题

    糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物（如猪、牛）中获得。自20世纪70年代遗传工程(又称基因工程)发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产，其操作的基本过程如图所示。

    （1）图中基因工程的基本过程可概括为“五步曲” ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
    (2)图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作＿＿＿＿，从其分子结构可确定它是一种＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
    (3)根据碱基互补配对的规律，在＿＿＿＿＿＿＿＿酶的作用下，把图中甲与乙拼接起来(即重组)，若a段与d段的碱基序列分别是AATTC和CTTAA，则b段与c段分别是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。
    (4)细菌进行分裂后，其中被拼接起来的质粒也由一个变成两个，两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为＿＿＿＿。目的基因通过活动(即表达)后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素。这是因为基因具有控制＿＿＿＿合成的功能，它的过程包括＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

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    科目：高中生物 来源：2010年河南省高二下学期期中考试生物卷 题型：综合题

    糖尿病是一种常见病，且发病率有逐年增加的趋势，以致西方发达国家把它列为第三号“杀手”。治疗该病的胰岛素过去主要从动物（如猪、牛）中获得。自20世纪70年代遗传工程(又称基因工程)发展起来以后，人们开始采用这种高新技术生产，其操作的基本过程如图所示。

    （1）图中基因工程的基本过程可概括为“五步曲” ＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

    (2)图中的质粒存在于细菌细胞内，在基因工程中通常被用作＿＿＿＿，从其分子结构可确定它是一种＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

    (3)根据碱基互补配对的规律，在＿＿＿＿＿＿＿＿酶的作用下，把图中甲与乙拼接起来(即重组)，若a段与d段的碱基序列分别是AATTC和CTTAA，则b段与c段分别是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

    (4)细菌进行分裂后，其中被拼接起来的质粒也由一个变成两个，两个变成四个……质粒的这种增加方式在遗传学上称为＿＿＿＿。目的基因通过活动(即表达)后，能使细菌产生治疗糖尿病的激素。这是因为基因具有控制＿＿＿＿合成的功能，它的过程包括＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。

     

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    棉铃虫是一种危害棉花的害虫。我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害。通过基因工程方法，科学家采用花粉粒通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并成功表达，棉铃虫食用了这种转基因棉花的植株后就会造成死亡。花粉粒通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，近而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。回答下列相关问题：

    （1）下列所示的黏性末端是由_______________种限制性内切酶作用产生的。

    （2）利用花粉粒通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因操作的基本步骤中的第________步，即___________________________________。为减少获得目的基因的盲目性，在获得真核生物的目的基因时，应尽量采用_________________________的方法。

    （3）该目的基因在导入受体细胞前需要与运载体结合，目前经常使用的运载体有：

    ________________、_________________和__________________。

    （4）检测该目的基因是否表达的最简便方法是__________________________________。

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    科目：高中生物 来源：黑龙江省鹤岗一中09-10学年高二下学期4月月考 题型：填空题

     棉铃虫是一种危害棉花的害虫。我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害。通过基因工程方法，科学家采用花粉管通道法将毒蛋白基因转入棉花植株并成功表达，棉铃虫食用了这种转基因棉花的植株后就会造成死亡。花粉管通道法是指：利用植物花粉萌发时形成的花粉管通道将毒蛋白基因送入胚囊，近而导入尚不具备细胞壁的合子或早期胚体细胞，借助天然的种胚系统，形成含有目的基因的种胚。

     

    （1）下列所示的黏性末端是由____________种限制性内切酶作用产生的。

    （2）利用花粉管通道法将毒蛋白基因导入棉花细胞，此过程是基因操作的基本步骤中的第________步，即__________________________。导入植物细胞的方法除花粉管通道法外还有_______________，_______________ 。

    （3）为减少获得目的基因的盲目性，在获得真核生物的目的基因时，应尽量采用__________________的方法。

    （4）该目的基因在导入受体细胞前需要与运载体结合，目前经常使用的运载体有：___________、_____________和_______________。

    （5）检测该目的基因是否表达的方法是_________________________________。

     

     

     

     

     

     

     

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