Question

【题目】尿素是一种重要的农业氮肥，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图筛选出能高效降解尿素的细菌．设计了“土壤中分解尿素细菌的筛选与计数实验”，过程如图所示：

（1）为达到实验目的，本实验所配置的培养基成分应包括：__．（填入编号）

①水②无机盐（不含氮） ③NH4NO3④尿素 ⑤葡萄糖 ⑥牛肉膏⑦蛋白胨 ⑧伊红美蓝 ⑨琼脂

（2）为能够进行菌落计数，本实验应采用的接种方法是__，接种工具是__。

（3）在接种前，进行①～⑤系列操作的意图是__．根据题意，为使菌液稀释10倍，每次应加入的无菌水量是__ml。

（4）甲同学设计了“计算→称量→溶解→灭菌→倒平板→接种土壤样本→菌落计数”的实验步骤，该同学忘记了在__（步骤名称）之前还需要__（遗忘的步骤名称）。

（5）乙同学分别接种了3个培养皿，一段时间后三个培养皿中分别长出了54个、46个、50个菌落，根据甲的实验结果，该1g土壤样本中约有分解尿素的细菌__个。

Answer 1

【答案】①②④⑤⑨ 涂布法 无菌玻璃刮铲 使菌液逐渐按梯度稀释 9 灭菌 调PH值 5×107

【解析】

（1）微生物培养基的成分主要包括碳源、氮源、水、无机盐，碳源选择⑤葡萄糖；要筛选能够分解尿素细菌，需要加入④尿素作为唯一氮源；对细菌进行计数时需要利用稀释涂布平板法，因此需要在培养基中加入⑨琼脂作为凝固剂；另外①水和②无机盐（不含氮）是培养基必需的。所以为达到实验目的，本实验所配置的培养基成分应包括①②④⑤⑨。

（2）为能够进行菌落计数，本实验应采用稀释涂布平板法，接种工具为无菌玻璃刮铲。

（3）在接种前，进行①～⑤系列操作的意图是使菌液逐渐按梯度稀释。根据题意，为使菌液稀释10倍，菌液取1ml，则每次应加入的无菌水量是9ml。

（4）培养基配置的基本过程：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤，甲同学设计的实验步骤，该同学忘记了在灭菌之前还需要调PH值。

（5）根据图解可知，对菌液进行稀释时共稀释了106倍，乙同学分别接种了3个培养皿，一段时间后三个培养皿中分别长出了54个、46个、50个菌落，根据甲的实验结果，该1g土壤样本中约有分解尿素的细菌=（54+46+50）÷3×106=5×107个。