回答下列有关微生物培养和分离的问题．(1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源.水.氮源.无机盐四类.培养基配制时.灭菌与调PH的先后顺序是先调PH.后灭菌．(2)若要测定培养液中微生物B的菌体数.可在显微镜下用血细胞计数板直接计数,若要测定其活菌数量.可选用稀释涂布平板法进行计数．(3)为了调查某河流的水质状况.某研究小组测定了该河流水样中� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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14．回答下列有关微生物培养和分离的问题．
（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、氮源、无机盐四类，培养基配制时，灭菌与调PH的先后顺序是先调PH，后灭菌．
（2）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数；若要测定其活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数．
（3）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌的分离等工作．
该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量．在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．
（4）为了将分离到的菌株纯化，挑取了菌落在3块相同平板上划线，结果其中一块平板的各划线区均未见菌生长，最可能的原因是接种环温度过高，菌被杀死．
（5）玉米秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合物，其中的葡萄糖糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖，在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成红色复合物．用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的透明圈．

分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，其基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤．
2．微生物常见的接种的方法：
①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落．
②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，一般可用于计数活菌数量．
3、纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖．
刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．

解答解：（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源、水、氮源、无机盐四类，培养基配制时，基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板五个步骤．
（2）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用血细胞计数板直接计数；若要测定其活菌数量，可选用稀释涂布平板法进行计数．
（3）采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养一段时间，这样做的目的是检测培养基平板灭菌是否合格．
（4）三块平板有两块平板长有菌落，说明含有菌株并可在培养基上生长；而其中一块未见菌落，说明菌株死亡．因此，应在接种过程中接种环灼烧后未冷却或未足够冷却，使菌株因温度过高被杀死．
（5）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，其中葡萄糖糖苷酶可将纤维二糖分解成葡萄糖；刚果红可以与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌．
故答案为：
（1）氮源和无机盐        先调PH，后灭菌
（2）血细胞计数板       稀释涂布平板
（3）检测培养基平板灭菌是否合格
（4）接种环温度过高，菌被杀死
（5）纤维二糖     红    透明圈

点评本题考查了微生物的分离与培养以及纤维素分解菌的有关知识，要求考生识记培养基的基本成分以及培养基的制备过程，掌握微生物分离与纯化的方法，识记纤维素酶的种类以及对应的水解产物，再结合所学的知识答题．

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