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    【题目】人乳铁蛋白是一种药用保健蛋白。下图表示利用乳腺生物反应器生产人乳铁蛋白的过程，图中Tetr表示四环素抗性基因，Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，五种限制酶的识别序列及切割位点如表所示，请回答以下问题：

    限制酶

    BamHⅠ

    HaeⅢ

    BclⅠ

    Sau3AⅠ

    NotⅠ

    识别序列及切割位点

    （1）要将人乳铁蛋白基因插入质粒，若只允许使用一种限制酶，应选择的限制酶是_________，酶能起催化作用的原理是_________________________________。

    （2）据图分析筛选含有重组质粒的受体细胞首先需要在含___________________（填“四环素”“氨苄青霉素”或“四环素或氨苄青霉素”）的培养基上进行，原因是_________________________________。

    （3）若 BamH I酶切的DNA末端与BclI酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为___________，对于该部位，这两种酶___________（填“都不能”或“只有一种能”）切开。

    （4）培养出早期胚胎后，科学家欲进行胚胎分割移植，则应该选择发育良好、形态正常的___________，将其移入盛有操作液的培养皿中，然后用分割针进行分割。

    【答案】Sau3AⅠ 可以显著降低化学反应的活化能 氨苄青霉素 用限制酶切割后破坏了Tetr基因，但不会破坏Ampr基因，导入重组质粒的受体细胞（对氨苄青霉素具有抗性），能在含氨苄青霉素的培养基上生存下来 都不能 桑椹胚或囊胚

    【解析】

    题图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程，该过程采用了基因工程技术（目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与表达）、动物细胞培养技术和胚胎移植技术。图中①表示将目的基因导入受体细胞；②表示早期胚胎培养；③表示胚胎移植；④表示产生转基因牛；⑤表示从转基因牛中获取目的基因产物。

    （1）根据表中五种酶的识别序列及切割位点可知，限制酶Sau3AI还可以切割限制酶BstⅠ和限制酶BamHⅠ的识别序列，因此要将人乳蛋白基因插入载体，在只允许用一种限制酶酶切载体和人乳铁蛋白基因的情况下，应选择限制酶Sau3AI。酶能起催化作用的原理是酶可以显著降低化学反应的活化能。

    （2）据用限制酶Sau3AI切割后会破坏四环素抗性基因，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此导入重组质粒的受体细胞可能在含有氨苄青霉素的培养基上生存下来。

    （3）根据表格中各种限制酶的识别序列和切割位点可知，若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接起来，连接部位的6个碱基对序列为，对于该部位，这两种酶都不能切开。

    （4）胚胎分割时，应该选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚。

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    （1）①②过程使用了__________酶，以使植物原生质体相互分离，此处使用的溶液浓度较大，以保证植物细胞会发生__________，以保护原生质体不被破坏；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是__________。

    （2）过程③在化学药剂________的作用下会发生细胞融合；动物细胞融合的方法与植物细胞不相同的是________。

    （3）过程__________属于脱分化，过程__________属于再分化，细胞发生分化的根本原因是__________。

    （4）过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是__________，其培养时选用的材料通常是分生组织，原因是______。

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    （1）据图实验进行到20min时，A植物叶片积累的有机物量_____________（填大于、小于或等于）B植物叶片，判断的依据是____________________________________________________。

    （2）根据上图研究结果判断，A、B两种植物，更适合生活在干旱土壤中的植物是_____________，理由是____________________。

    （3）浇水可解除干旱胁迫，请用文字和箭头形式说明给植物浇H218O形成C6H12O6的过程中氧原子的转移途径：_________________________________。

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    B. 活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程

    C. 在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹

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    （3）要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，检测的方法是用________________作为探针，与______________________________结合，若结果显示杂交带，表明目的基因插入到染色体DNA上。

    （4）若控制酶B基因有1656个碱基对，下图表示筛选获得的受体细胞中编码酶B的mRNA的部分碱基序列（已知：起始密码子为AUG，GUG；终止密码子为UAA，UAG，UGA）

    图中框内mRNA片段包含了___________个密码子，如框后的序列未知，预测框后的第一个密码子最多__________种。

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