Question

1．目前，精子载体法逐渐成为最具诱惑力的制备转基因动物方法之一，该方法以精于作为外源基因的载体，使精于携带外源基因进入卵细胞受精．下图是表示利用该方法制备转基因鼠的基本流程．请据图回答：

（1）获取外源基因常用到的工具酶是限制性核酸内切酶（限制酶）．为了提高实验成功率，通常利用PCR技术获得大量标记的外源基因．
（2）过程②采用的是体外受精技术，该过程中应对已经导人外源基因的精子进行获能处理．
（3）过程③需要在无菌无毒、适宜的温度和PH、营养充足、气体环境（至少写出两点）等条件下培养．由于人们对动物细胞所需营养物质还没有完全搞清楚，因此在培养细胞对需在培养基中加入一定量的动物血清（或血浆）．
（4）为了获得更多的早期胚胎，常用促性腺激素对供体进行处理，促使其超数排卵．从而获得更多的卵母细胞．

Answer 1

分析 1、分析图可知，通过转基因技术将目的基因导入到成熟精子的染色体中，再通过体外受精作用将目的基因移入到受精卵中，再通过早期胚胎培养和胚胎移植，最终获得转基因鼠．①过程是转化目的基因进入精子的染色体上，②过程是体外受精，③过程是早期胚胎培养，④过程是胚胎移植．
2、PCR技术扩增目的基因（适用于目的基因的核苷酸序列已知的情况）．PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，其原理是DNA复制，需要模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶），以指数的方式扩增，即约2n．可以在短时间内大量扩增目的基因．

解答 解：（1）获取目的基因时，需要限制酶切割．为了提高实验成功率，可以通过PCR扩增技术，可以在短时间内大量扩增目的基因．
（2）②过程是携带外源基因的精子与卵细胞发生体外受精，形成受精卵．精子必须获能才可以与卵细胞发生受精作用．
（3）受精卵移入发育培养液中继续培养，培养液成分一般都比较复杂，除了含有各种无机盐、有机盐类、维生素、氨基酸、核苷酸、激素等外，还要添加血清等物质．
（4）卵母细胞的采集可以用促性腺激素作用与雌性动物，使其超数排卵，以此获取较多的卵母细胞．
故答案为：
（1）限制性核酸内切酶（限制酶）   PCR
（2）体外受精   获能
（3）无菌无毒、适宜的温度和PH、营养充足、气体环境     动物血清（或血浆）
（5）促性腺   超数排卵

点评 本题考查基因工程和胚胎工程的相关内容，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系；理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力．