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    在基因工程技术中，下列方法与目的基因获得无关的是（    ）

    A.辐射诱变法

    B.散弹射击法

    C.反转录法

    D.人工合成法

    A


    解析:

    考查提取目的基因的方法。基因工程中提取目的基因的方法主要有两条：一条是从供体细胞的DNA中直接分离目的基因，其中最常用的方法是“鸟枪法”，又叫“散弹射击法”。它是用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多段，将这些段分别载入运载体，然后转入不同的受体细胞，让供体细胞所提供的外源DNA在各个受体细胞中复制，从中找出含有目的基因的细胞，再把目的基因分离出来。另一条是人工合成目的基因。该方法有两条途径：一是用反转录法，以目的基因转录形成的信使RNA为模板，反转录成互补的DNA单链，再合成双链DNA；二是根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测信使RNA的序列，再推测相应结构基因的序列，然后通过化学方法合成。辐射诱变法能改变基因结构，不能获取目的基因。

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    科目：高中生物 来源：江西省南昌三中2011届高三第六次月考生物试题 题型：071

    基因工程又叫基因拼接技术。

    （1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的________为模板，________成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

    （2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、________。

    （3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：________和________。

    （4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是，则EcoRI的识别序列和切点是________（切点用箭头标在序列上）。

    （5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80％的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有________和________等。

    （6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术．某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A∶G∶T∶C＝1∶2∶3∶4，则经过PCR仪五次循环后，将产生________个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是________个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：

    ①__________________。

    ②__________________。

    （7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有________，________以

    及________。

    （8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行________杂交，若有________出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

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    科目：高中生物 来源： 题型：阅读理解

    2．(2012·天津理综)黄曲霉毒素B1(AFB1)存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起癌变。某些微生物能表达AFB1解毒酶，将该酶添加在饮料中可以降解AFB1，清除其毒性。回答下列问题：

    (1)AFB1属于________类致癌因子。

    (2)AFB1能结合在DNA的G上，使该位点受损伤变为G*，在DNA复制中，G*会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为________。

    (3)下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图。

    据图回答问题：

    ①在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶；乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶。过程Ⅰ应选择________菌液的细胞提取总RNA，理由是_____________________________________________________________。

    ②过程Ⅱ中，与引物结合的模板是____________________________________________________________。

    ③检测酵母工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用________方法。

    (4)选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表。

    组别

    添加

    肝脏AFB1残留量(ng/g)

    AFB1

    (μg/kg饲料)

    AFB1解毒酶(g/kg饲料)

    A

    0

    0

    6.4

    B

    100

    0

    20.9

    C

    100

    1

    16.8

    D

    100

    3

    11.7

    E

    100

    5

    7.3

    F

    100

    7

    7.3

    据表回答问题：

    ①本实验的两个自变量分别为_____________________________。

    ②本实验中，反映AFB1解毒酶解毒效果的对照组是________。

    ③经测定，某污染饲料中AFB1含量为100 μg/kg，则每千克饲料应添加________克AFB1解毒酶，解毒效果最好，同时节约了成本。

    (5)采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高酶的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的________序列。

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    科目：高中生物 来源：2011届江西省南昌三中高三第六次月考生物试卷 题型：综合题

    （17分）基因工程又叫基因拼接技术。
    （1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的      为模板，  　  成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。
    （2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、 　　　　 。
    （3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 　　　　 和  　　　 。
    （4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。
    （5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。
    （6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生    个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是          个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：
    ①                                                                 。
    ②                                                                 。
    （7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有     ，      以
    及            。
    （8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行            杂交，若有          出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

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    科目：高中生物 来源：2010-2011学年江西省高三第六次月考生物试卷 题型：综合题

    （17分）基因工程又叫基因拼接技术。

    （1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的       为模板，   　   成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

    （2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、  　　　　  。

    （3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：  　　　　 和   　　　 。

    （4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。

    （5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。

    （6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生     个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是           个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：

    ①                                                                  。

    ②                                                                  。

    （7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有      ，       以

    及             。[来源:学#科#网Z#X#X#K]

    （8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行             杂交，若有           出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

     

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    科目：高中生物 来源： 题型：

    基因工程又叫基因拼接技术。

    （1）在基因工程技术中，用人工合成方法获得目的基因的途径之一是：以目的基因转录的       为模板，   　   成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成目的基因。

    （2）基因工中常用的受体细胞有细菌、真菌、  　　　　  。

    （3）在基因工程技术中，DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：  　　　　 和   　　　 。

    （4）大肠杆菌质粒经EcoRI（一种限制性核酸内切酶）切割后所形成的黏性末端之一是 ，则EcoRI的识别序列和切点是_____________________（切点用箭头标在序列上）。

    （5）将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，约80%的转基因植物都是通过这种方法获得。除此法之外，还有____________和____________等。

    （6）聚合酶链式反应（PCR技术）是在实验室中以少量样品DNA制备大量DNA的生化技术.某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环后，将产生     个DNA分子，其中需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是           个。请指出PCR技术与转录过程的二个不同之处：

    ①                                                                  。

    ②                                                                  。

    （7）一个基因表达载体的组成，除了目的基因之外，还必须有      ，       以

    及             。

    （8）在目的基因的监测与鉴定工作中，又是需监测目的基因是否翻译成蛋白质，监测的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行             杂交，若有           出现，表面目的基因已经形成蛋白质产品。

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