Question

4．饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用．若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解称为可以吸收利用的磷酸盐等．如图是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图．请分析作答．

（1）分离产植酸酶的菌株，需先配制合适的培养基．配制培养基时，在各成分都融化后和分装前，要进行的是调整pH和灭菌．对培养基进行灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌法．
（2）接种以前进进行的一系列稀释操作，目的是在固体培养基表面形成单个菌落．这种接种方法是稀释涂布平板法．根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数．如果一培养基上有3个菌落，则1g土壤中大致的活菌数量是3×10⁶个．
（3）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．实验结果显示A～E五种菌株中，E是产植酸酶最理想的菌株．
（4）植酸酶的活力可用单位时间单位体积内底物消耗（产物产生）的量来表示．

Answer 1

分析 1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板．
2、稀释涂布平板法在培养基上分离、培养出微生物的单个菌落，以便于计数、移植、分离，从而达到纯培养的目的．
3、由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶．

解答 解：（1）配制培养基时，在各成分都融化后和分装前，要进行的是调pH和灭菌．对培养基灭菌的常用方法是高压蒸汽灭菌．
（2）接种以前进行的一系列稀释操作，表明该接种方式为稀释涂布平板法，目的是在培养皿表面形成单个菌落．根据土壤样品的稀释倍数和接种稀释液的体积，统计平板上的菌落数就能大致推测出样品中的活菌数．如果按题中处理后，统计的平板上平均有3个菌落，则1g土壤中大致的活菌数量=3÷0.1×10⁵═3×10⁶．
（3）由于植酸钙的不溶解性，使培养基中形成白色浑浊．产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产生植酸酶．分析题图可知，菌落E周围的透明圈最大，是产植酸酶的理想菌株．
（4）植酸酶的活力可用单位时间单位体积内底物消耗（产物产生）的量来表示．
故答案为：
（1）调整pH   高压蒸汽灭菌法
（2）单个菌落 　 稀释涂布平板法   菌落数   3×10⁶
（3）E
（4）单位时间单位体积内底物消耗（产物产生）

点评 本题的知识点是培养基的营养成分，实验过程中的无菌技术，统计样品中菌落数的方法，主要考查学生对微生物培养知识的掌握和利用微生物培养技术解决生产、生活中问题的能力．