Question

以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料：

A．核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶（水解DNA的酶）的抑制剂柠檬酸钠，以除去Mg，防止DNA酶的激活。

B．核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白（由核酸和蛋白质组成）的形式存在，DNA核蛋白在1mol NaCl溶液中溶解度很大，但在0.14mol·NaCl溶液中的溶解度很低；而RNA核蛋白溶于0.14mol· NaCl溶液。

C．用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内；在DNA溶液中加入2.5倍体积，浓度为95％的酒精，可将DNA分离出来。此时DNA十分粘稠，可用玻棒搅成团取出。

D．DNA在强酸环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。

E．实验材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、0.14mol· NaCl溶液、1mol· NaCl溶液、蒸馏水、苯酚、95％酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。

F．实验步骤：研磨得匀浆→过滤得滤液→滤液稀释6倍→离心处理得沉淀物 →沉淀物再溶解→加苯酚静置后去上清液→提取出DNA→DNA鉴定。

请阅读以上材料回答下列问题：

（1）研磨时，取10g花椰菜，加适量的石英砂和____________ 、____________。

（2）将滤液稀释6倍，其目的是______________________________________________。

（3）取沉淀物，置于2mL 1mol· NaCl 溶液中，使DNA核蛋白再次溶解，再加2mL苯酚充分震荡后静止，待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去__________。

（4）如何将剩余溶液中的DNA提取出来? _____________________________________

______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________

_____________________________________________________。

（5）如何证明提取物确实是DNA分子?________________________________________

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_____________________________________________________。

 

Answer 1

答案：
解析：

（1）1mol·NaCl溶液　柠檬酸钠 （2）使DNA核蛋白的溶解度逐渐降低　　（3）蛋白质 （4）向下层DNA溶液中加2.5倍体积，浓度为95％的酒精，此时用玻棒搅动，在玻棒上的成团物即是DNA （5）用适量的浓硫酸处理提取物，再滴加二苯胺试剂数滴，如有蓝色物质出现即可证明提取物是DNA。