Question

【题目】下图为获得抗除草剂转基因玉米A的技术路线，含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。相关叙述错误的是

A. 采用PCR扩增目的基因时，设计的引物间要避免形成氢键

B. 为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种不同的限制酶

C. 检测是否转化成功，需要依次利用抗生素抗性基因和报告基因

D. 利用T-DNA可以将目的基因插入到农杆菌的染色体DNA上

Answer 1

【答案】D

【解析】

据图分析可知，质粒上含有抗生素抗性基因，可以作为标记基因，因此需要用含抗生素的培养基筛选出成功导入表达载体的农杆菌。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色，因此可用无色物质K处理愈伤组织并筛选出呈现蓝色的组织，即表示基因表达载体成功导入到了愈伤组织细胞中。

A、采用PCR扩增目的基因时，设计的引物应与模板链结合，所以引物间不能形成氢键，A正确；

B、为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用两种不同的限制酶，产生不同的黏性末端，以防止酶切产物自身环化，B正确；

C、利用抗生素抗性基因可检测基因表达载体是否导入农杆菌，由于转化过程中愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长，且含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色，所以再通过报告基因可检测目的基因是否转化成功，C正确；

D、农杆菌属于原核生物，无染色体，D错误。

故选D。