Question

6．花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因．用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力．再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株．流程如图所示．据图回答下列问题：
（1）过程①所需的酶是纤维素酶和果胶酶．
（2）过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的叶绿体存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志．
（3）原生质体培养液的浓度要适宜，原因是保持原生质体完整性．原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化形成愈伤组织．
（4）若分析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，通过解离、漂洗、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目．
（5）对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株．

Answer 1

分析 根据题意和图示分析可知：图示为采用植物体细胞杂交技术获得抗黑腐病杂种植株的流程图，其中①表示采用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁的过程；②表示诱导原生质体融合的过程；之后再采用植物组织培养技术即可得到杂种植株．

解答 解：（1）细胞壁的主要成分是纤维素和果胶；①过程是去除细胞壁，需要用纤维素酶和果胶酶．
（2）根中不存在叶绿体，而叶片中存在叶绿体，故可以根据是否有供体的叶绿体存在来进行初步筛选．
（3）原生质体没有细胞壁，如果渗透压不平衡会发生涨破的现象，为了保持原生质体的完整性，培养液要有适宜的浓度．原生质体需要经过细胞壁再生形成杂种细胞，然后再经过脱分化和再分化形成杂种植株．
（4）染色体在显微镜下能观察到，要观察染色体型可以与双亲的进行比较，观察染色体要经过解离、漂洗、染色和制片后再使用显微镜进行观察．
（5）在个体水平上可以通过对杂种植株进行黑腐病菌接种实验，可筛选出具有高抗性的杂种植株．
故答案为：
（1）纤维素酶和果胶酶
（2）叶绿体
（3）保持原生质体完整性  细胞壁
（4）双亲（或花椰菜和黑芥）    解离    漂洗
（5）黑腐病菌

点评 本题结合培育抗黑腐病杂种植株的流程图，考查植物体细胞杂交的相关知识，要求考生识记植物体细胞杂交的概念、过程及意义，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题．