Question

（07天津卷）30．在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗基因（kan²）常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。

请据图回答：

（1）A过程需要的酶有                                               。

（2）B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是                ；                          。

（3）C过程的培养基因除含有必要营养物质、琼脂和激素外，还必须加入          。

（4）如果利用DNA分子杂交原理对再生植物进行检测，D过程应该用                                      作为探针。

（5）科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。

①将转基因植株与                  杂交，其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1∶1。

②若该转基因植株自交，则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为     。

③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养，则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占       ％。

Answer 1

答案：（1）限制性内切酶和DNA连接酶

（2）具有标记基因    能在宿主细胞中复制并稳定保存

（3）卡那霉素

（4）放射性同位素（或荧光分子）标记的抗虫基因

（5）①非转基因植株    ②3∶1    ③100

解析：本题考查的知识点较多：植物的组织培养、基因工程、细胞核遗传等。作为基因工程操作的基本步骤：目的基因与质粒的重组，需要限制性内切酶和DNA连接酶才能完成，是否导入需要检测，因为标记基因是卡那霉素抗性基因，所以在培养时除了在培养基中加入植物组织培养所需的营养物质、植物激素外，还要加入卡那霉素，以便于检测重组质粒是否导入离体的棉花叶片组织细胞中了。题目中已明确告诉我们，转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律，因此必为细胞核遗传，由题意可知卡那霉素抗性基因为显性基因，获得的转基因植株为杂合体植株，所以产生的花药有两种类型，一种是抗卡那霉素型，一种是卡那霉素敏感型，且数量相等，因此放在含有卡那霉素的培养基上离体培养，只有抗卡那霉素型才能形成单倍体植株，即100%为抗卡那霉素型植株。