Question

（7分）如图18所示，若用两种识别切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切下目的基因，并将之取代质粒pZHZ1(3.7kb，1kb=1000对碱基)上相应的E—F区域 (0.2kb)，

(1)那么所形成的重组质粒pZHZ2___________。

A．既能被E也能被F切开           B．能被E但不能被F切开

C．既不能被E也不能被F切开       D．能被F但不能被E切开

(2)已知在质粒pZHZl中，限制酶G切割位点距限制酶E切割位点0.8kb，限制酶H切割位点距限制酶F切割位点O.5kb。若分别用限制酶G和H酶切两份重组质粒pZHZ2样品，据表4所列酶切结果判断目的基因的大小为___________kb；并将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图19中。（2分）

(3)若想在山羊的乳汁中收获上述目的基因的表达产物，则应该选择的受体细胞是______。若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子山羊的方式是__________。

(4)上述目的基因模板链中的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的tRNA上相应的碱基序列是________。

 

Answer 1

【答案】

（7分）

（1）A    （2）1.2

（2分）

（3）受精卵   转基因山羊间相互交配     （4）UGA

【解析】

试题分析：⑴限制酶具有专一性，只能识别特定的DNA序列，并在特定的位点切割磷酸二酯键形成DNA片段。由题意可知，重组质粒上含有限制酶E和F的切割位点，所以既能被E也能被F切开。A项正确。

⑵根据题中信息，原来质粒长度为3.7kb，切去EF（0.2kb）之后还有3.5kb，插入目的基因后形成重组质粒，重组质粒的长度为1.6+3.1=1.2+3.5=4.7kb，进而可推导出目的基因长度为4.7－3.5＝1.2kb。重组质粒中G的切割位点距E的切割位点0.8kb，单独用限制酶G切割后产生1.6kb和3.1kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的G酶切位点外，还有一个G酶切位点；H的酶切位点距F0.5kb，用H单独酶切后产生1.2kb和3.5kb两种片段，说明在重组质粒中除了图中标示出来的H酶切位点外，还有一个H酶切位点；根据题中信息提示“将目的基因内部的限制酶G和H切割位点标注在图中”，可确定在EF之间分别含有一个G和H的酶切位点，进而可断定G的识别位点，在距E点右侧0.8kb处，H的识别位点在距F左侧0.7kb处。

⑶将目的基因导入动物细胞中，通常以受精卵为受体细胞；重组质粒若插入一条染色体DNA上后，可通过雌雄转基因山羊杂交的方法来获取转基因纯合子山羊。

⑷根据碱基互补配对原则，目的基因的模板链中碱基为TGA，则mRNA中对应的密码子为ACU，tRNA中的反密码子为UGA。

考点：本题考查基因工程的相关知识，涉及基因工程限制酶酶切位点的确定，常用受体细胞，密码子和反密码子的推导等相关知识，意在考查考生能运用所学知识与观点，通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理，做出合理的判断的能力。