回答下列有关基因工程的问题．为扩大耕地面积.增加粮食产量.黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注．我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系．图1为几种限制酶识别序列及其切割位点.图2为耐盐基因的部分序列.图3.图4中箭头表示相关限制酶的酶切位点．(1)图5中A-D所示的黏性末端是由种限制性内切酶作用产生的.其中所示粘性末端为用EcoRⅠ酶� 题目和参考答案——青夏教育精英家教网—

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回答下列有关基因工程的问题．
为扩大耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注．我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系．图1为几种限制酶识别序列及其切割位点，图2为耐盐基因的部分序列，图3、图4中箭头表示相关限制酶的酶切位点．

（1）图5中A-D所示的黏性末端是由

种限制性内切酶作用产生的，其中

所示粘性末端为用EcoRⅠ酶切后所得．
（2）图4中限制性核酸内切酶作用于图2中的

（填“a”或“b”）处，其特异性表现为

．如同时用EcoRⅠ和HindⅢ酶切外源DNA，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是

．
（3）构建重组质粒时，如同时使用EcoRⅠ和HindⅢ酶，则可以形成

种重组质粒．
（4）如图2耐盐基因的片段序列可控制合成“-脯氨酸-谷氨酸-谷氨酸-赖氨酸-”的氨基酸序列，则翻译上述多肽的mRNA是由该基因的

链转录的．（以图中①或②表示）（脯氨酸的密码子是：CCU、CCC、CCA、CCG；谷氨酸的是GAA、GAG；赖氨酸的是AAA、AAG．）
（5）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用

技术，该技术的核心是

和

．
（6）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的

作探针进行分子杂交检测，又要用

方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．

考点：基因工程的原理及技术,植物组织培养的概念及原理

专题：

分析：分析图1：图1为几种限制酶识别序列及其切割位点．
分析图2：图2为耐盐基因的部分序列，其中a是磷酸二酯健，b是氢键．
分析图3：图3表示质粒的结构示意图，其中箭头表示相关限制酶的酶切位点；
分析图4：图4表示含有目的基因的外源DNA分子，其中箭头表示相关限制酶的酶切位点．
分析图5：限制酶的识别序列一般为回文序列，图5中形成A粘性末端的限制酶的识别序列为GAATTC∥CTTAAG，形成B粘性末端的限制酶的识别序列为CAATTG∥GTTAAC，形成C粘性末端的限制酶的识别序列为GTTAAC∥CAATTG，形成D粘性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG∥GAATTC．

解答： 解：（1）图5中形成A粘性末端的限制酶的识别序列为GAATTC∥CTTAAG，形成B粘性末端的限制酶的识别序列为CAATTG∥GTTAAC，形成C粘性末端的限制酶的识别序列为GTTAAC∥CAATTG，形成D粘性末端的限制酶的识别序列为CTTAAG∥GAATTC，由此可见，图5中A-D所示的黏性末端是由4种限制性内切酶作用产生的，其中A所示粘性末端为用EcoRⅠ酶（识别序列为GAATTC∥CTTAAG）切后所得．
（2）限制酶的作用位点是磷酸二酯健，即图4中a处；限制酶具有特异性，即特异性的识别并切割DNA．如同时用EcoRⅠ和HindⅢ酶切外源DNA，若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶酶切后，这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是9（若只切开左侧的EcoRⅠ酶的切割位点，则能形成2种不同长度的DNA片段；若只切开HindⅢ酶的切割位点，则能形成2种不同长度的DNA片段；若只切开右侧的EcoRⅠ酶的切割位点，则能形成2种不同长度的DNA片段；若只切开左侧EcoRⅠ酶和HindⅢ酶的切割位点，则能形成3种不同长度的DNA片段，其中有2种长度之前已经出现过；若只切开右侧EcoRⅠ酶和HindⅢ酶的切割位点，则能形成3种不同长度的DNA片段，其中有2种长度之前已经出现过；若只切开左侧EcoRⅠ酶和右侧EcoRⅠ酶的切割位点，则能形成3种不同长度的DNA片段，其中有2种长度之前已经出现过）．
（3）构建重组质粒时，如同时使用EcoRⅠ和HindⅢ酶，则可以形成2种重组质粒（一种含有目的基因，另一种不含目的基因）．
（4）如图2耐盐基因的片段序列可控制合成“-脯氨酸-谷氨酸-谷氨酸-赖氨酸-”的氨基酸序列，则根据其密码子序列CC_GA_GA_AA_可知其转录的模板链是②链．
（5）将导入目的基因的水稻细胞培养成植株还需要利用植物组织培养技术，该技术的核心是脱分化和再分化．
（6）探针是被标记的目的基因的单链，因此为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的耐盐基因（目的基因）作探针进行分子杂交检测，又要用一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性．
故答案为：
（1）4      A
（2）a    特异性的识别并切割DNA     9
（3）2
（4）②
（5）植物组织培养      脱分化（去分化）     再分化
（6）耐盐基因（目的基因）        一定浓度盐水浇灌（移栽到盐碱地中）

点评：本题结合图解，考查基因工程的相关知识，要求考试识记基因工程的原理、操作步骤、操作工具，掌握各操作步骤中需要注意的相关细节，能结合图中信息准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查．

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