Question

天然酿酒酵母菌通常缺乏分解淀粉的酶类，用作发酵原料的淀粉需经一系列复杂的转化过程才能被利用。研究者从某丝状真菌中获取淀粉酶基因并转入酿酒酵母菌，获得的酿酒酵母工程菌可直接利用淀粉产生酒精。请回答下列问题：?

（1）将淀粉酶基因切割下来所用的工具是____，用____将淀粉酶基因与载体拼接成新的DNA分子，下一步将该DNA分子____，以完成工程菌的构建。?

（2）若要鉴定淀粉酶基因是否插入酿酒酵母菌，可采用的检测方法是____；若要鉴定淀粉酶基因是否翻译成淀粉酶，可采用____检测；将该工程菌接种在含淀粉的固体平板培养基上，培养一定时间后，加入碘液，工程菌周围出现透明圈，该现象发生的原因是____。

（3）如何进一步鉴定不同的转基因工程菌菌株利用淀粉能力的大小？?
____。

（4）微生物在基因工程领域中有哪些重要作用？?
____。

Answer 1

（1）限制酶（限制性内切酶） DNA连接酶 导入受体细胞

（2）DNA分子杂交技术 抗原—抗体杂交或淀粉酶活性 该工程菌产生的淀粉酶可分泌至培养基，水解淀粉后的区域，遇碘不再变蓝色，产生透明圈

（3）测定相同培养条件下不同工程菌菌株的淀粉酶活性或酒精产量

（4）①工具酶主要来自微生物；②最重要的目的基因供体库之一；③目的基因的载体之一；④作为受体细胞；⑤提供用于发酵的工程菌?

 基因工程操作的工具是限制性内切酶、DNA连接酶和运载体；基因工程操作的步骤为提取目的基因——目的基因与运载体结合——将目的基因导入受体细胞——目的基因的检测与表达。目的基因的检测有多种手段，如①用基因探针对目的基因进行标记，然后在宿主细胞中检测。②DNA分子杂交技术：利用被标记DNA单链与目的基因中的DNA链进行碱基互补配对的原理组成DNA双链，如果双链出现杂交带就表明目的基因已导入。③抗原—抗体杂交技术：检测目的基因是否能翻译出蛋白质，利用抗体对抗原的专一性。④全基因组PCR检测（前提是宿主细胞没有该基因）：看是否有目的基因上目的大小片段，再做琼脂糖电泳鉴定。微生物在基因工程具有重要的作用，如获取运载体，用来生产多肽药物等。?