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    【题目】肿瘤的生长依赖于新生血管，血管内皮生长因子（VEGF）是目前公认最关键的促血管形成因子。为研究促性腺激素释放激素（GnRH）类似物（药物甲）、“顺铂”（一种化疗药物乙）及其联合作用对卵巢癌动物血管生成的影响，研究人员以卵巢癌细胞为研究对象，检测细胞中血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质的含量。

    材料：3mg/L顺铂、10-7mol/LGnRH类似物、胰蛋白酶、12孔细胞培养板（每个孔可进行细胞培养）、卵巢癌细胞、细胞培养液、C02培养箱

    （要求与说明：不考虑加入顺铂和GnRH类似物对体积的影响；VEGF的mRNA和蛋白质含量的具体检测步骤不要求；实验条件适宜）

    （1）实验思路（药物加入设计画在下面的12孔细胞培养板示意图中即可，无需再文字说明；药物可用甲、乙表示；药物作用3天，每24h检测一次，无需前测；重复实验不要求）_______

    （2）若GnRH类似物、顺铂都能抑制血管生成，且联合作用效果更佳。请画出药物作用48h时血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质相对含量的柱形图。_______

    （3）实验分析：

    ①促性腺激素释放激素由_______产生。

    ②如果已得到上述第（2）小题中的实验结果，为了进一步在活体水平上验证这两种药物及其联合作用的影响，下一步你将选用身体状况一致的_______动物，随机均分后，分组进行药物处理，观察_______。

    【答案】 ①取等量的卵巢癌细胞和细胞培养液加入到12孔板细胞培养板中培养②将12孔细胞培养板置于C02培养箱中培养，每24h取对应组细胞用胰蛋白酶处理，吸取细胞检测其mRNA和蛋白质的含量，并记录③分析统计实验数据 下丘脑 患卵巢癌 血管生成的长度或条数

    【解析】【试题分析】

    本题属于补充完善实验步骤类试题，要根据实验目的确定实验变量，审读所提供的信息中是否准确控制了实验变量，是否遵循对照原则、单一变量原则等。对此类问题的考查，主要是看考生是否知道实验变量的控制及实验原则的遵循。

    （1）本实验的目的是研究药物甲、乙及其联合作用对卵巢癌动物血管生成的影响，根据题意和对照实验原则，实验设计思路为：①取等量的卵巢癌细胞和细胞培养液加入到12孔板细胞培养板中培养。实验处理分为四组，详见答案。②将12孔细胞培养板置于C02培养箱中培养，每24h取对应组细胞用胰蛋白酶处理，吸取细胞检测其mRNA和蛋白质的含量，并记录。③分析统计实验数据。

    （2）由题意可知，GnRH类似物、顺铂都能抑制血管生成，且联合作用效果更佳。所以药物作用48h时血管内皮生长因子的mRNA和蛋白质相对含量依次为对照组含量最高、甲、乙单独处理组次之、甲、乙联合作用组（甲+乙）最低，具体见答案。

    （3）①促性腺激素释放激素由下丘脑产生。

    ②为了进一步在活体水平上验证这两种药物及其联合作用的影响，下一步将选用身体状况一致的患卵巢癌动物,随机均分后，分组进行药物处理，观察血管生成的长度或条数。

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