Question

16．关于组织培养请回答相关问题：
（1）离体的植物组织和细胞，对营养、环境等条件的要求相对特殊，需要配制适宜的培养基．常用的一种培养基是MS培养基，其制备过程为：配制各种母液→配制培养基→灭菌．
（2）材料的选择与培养基的组成是诱导花粉植株的主要影响因素．
①一般来说，花粉处于单核期的花药培养成功率最高．选择花药时，一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期．对于某些花粉细胞不易着色，需采用焙花青-铬钒法．
②培养基中生长素与细胞分裂素用量比值适中时，能促进愈伤组织的形成．
（3）用消毒后的花蕾剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织．
（4）一般经过20-30d培养后，会发现花药开裂，长出愈伤组织或形成胚状体．将愈伤组织及时转移到分化培养基上，以便获得再生植株．在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常会发生染色体组数目变化．因此还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选．

Answer 1

分析 花药的离体培养材料的选择要是选择单核期以前的花药接种，质地幼嫩，极易破碎；选择单核期以后的花药接种，花瓣已有些松动，又给材料的消毒带来困难，通常不选择盛开或略微开放的花．选择花药时，确定花药发育时期最常用的方法是醋酸洋红法．某些植物的花粉不易着色需采用焙花青-铬矾法，这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色．花蕾用体积分数为70%的酒精浸泡30s→无菌水冲洗→吸干表面的水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中2～4min→无菌水再冲洗3～5次．在无菌条件下剥离花药时要尽量不损伤花药（否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织），同时还要彻底除去花丝．因为花丝的存在不利于愈伤组织或胚状体的形成．实验流程为：材料的选取→材料的消毒→接种和培养→结果分析与评价．

解答 解：（1）植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基，其制备过程为：配制各种母液→配制培养基→灭菌．
（2）选取花粉为离体培养材料，一般要求花粉处于单核期成功率最高，所以在选取花药时要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期．培养基中生长素与细胞分裂素用量比值适中时，能促进愈伤组织的形成．
（3）剥离花药时，要尽量不损伤花药，否则接种后容易从受伤部位产生愈伤组织．
（4）在花药培养中，特别是通过愈伤组织形成的花粉植株，常会发生分化培养基染色体组数目变化，因此还需要对培养出来的植株作进一步的鉴定和筛选．
故答案为：
（1）MS培养基  各种母液
（2）①单核   镜检   焙花青-铬钒法    ②愈伤组织
（3）受伤部位
（4）分化培养基    染色体组数目

点评 本题主要考查植物组织（花药离体培养）培养的相关知识，意在考查学生理论联系实际，综合运用所学知识解决自然界和社会生活中的一些生物学问题的能力；能关注对科学、技术和社会发展有重大影响和意义的生物学新进展以及生物科学发展史上的重要事件．