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【题目】某研究小组针对“二氯二乙胺对癌细胞增殖的影响”这一课题设计实验进行探究。

实验材料:肝部长有肿瘤的小鼠,二氯二乙胺溶液,蒸馏水,生理盐水,含有全部营养物质的细胞培养液,显微镜,血球计数板,试管,吸管,培养皿等。

1)该小组实验操作如下:(请将实验内容补充完整)

a、取洁净的培养皿一个,加入适量的培养液,从小鼠肝部切取肿瘤组织,剪碎,并用_________________处理,使其分散开来,配制成_________________,将其均匀分成5份,置于5个培养皿中培养,分别编号。

b、取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号l2345,并在1-4号试管中加入___________________的二氯二乙胺溶液,在5号试管中加入等量的生理盐水,作为对照组。

c、将步骤b5支试管中的溶液分别倒入步骤a5个培养皿中,摇匀后,在_________________的条件下培养一段时间。

d、取出5个培养皿,振荡摇匀后,分别吸取适量的培养液,用______________(工具)在显微镜下观察计数并记录。

2)该小组实验后得到的结果如下图所示。

①在该实验中,自变量是__________________________________

②根据实验结果,你能得出的结论是___________________________________________

【答案】胰蛋白酶 细胞悬液 等量的不同浓度 相同且适宜 血球计数板 二氯二乙胺的浓度 二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,在一定范围内,随二氯二胺浓度的增大,抑制作用逐渐增强

【解析】

1、分析题意可知,本实验目的是探究二氯二乙胺对癌细胞增殖的影响,自变量为二氯二乙胺的浓度,因变量为癌细胞的数目。

2、动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

1)该小组实验操作如下:(请将实验内容补充完整)

a、胰蛋白酶能水解细胞表面的蛋白质,是组织细胞分散开,所以动物细胞培养常用胰蛋白酶处理,使其分散开来,配制成细胞悬液。

b、实验设置应遵循对照原则,所以取洁净的试管5支,加入等量的培养液,编号1、2、3、4、5,并在1-4号试管中加入等量的不同浓度的二氯二乙胺溶液,5号试管中加入 等量的生理盐水,和前4只试管进行对照;

c、实验过程中对于无关变量应保持相同且适宜;

d、显微镜下观察计数需要用血球计数板。

2)该实验实验目的是探究二氯二乙胺对癌细胞增殖的影响。

①分析曲线可知,在该实验中,自变量是二氯二乙胺的浓度。

②分析实验结果可知,随着二氯二乙胺浓度增加,细胞数目逐渐减少,说明二氯二乙胺能抑制癌细胞的增殖,在一定范围内,随二氯二胺浓度的增大,抑制作用逐渐增强。

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3)用于核移植的供体细胞,一般选用10代以内的细胞,原因是10代以内的细胞分裂能力强,__________________________________________

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