Question

进行植物体细胞杂交，首先需要除去细胞壁。现提供以下材料和用具：白色洋葱鳞片叶，紫色洋葱鳞片叶，适宜浓度的蔗糖液，纤维素酶和果胶酶，蒸馏水，镊子，显微镜，载玻片，盖玻片等。请你从中选取合适的材料配制成合理的细胞壁分解液，并设计出检验它除去细胞壁的方法步骤，预测和解释实验的结果。

(1)实验步骤

①配制细胞壁分解液

选取____________________________________________配制成细胞壁分解液。这样选取的理由是___________________________________________________________。?

②检验细胞壁分解液除去细胞壁的方法?

第一步：___________________________________________________________________

__________________________________________________________________。

第二步：用适宜浓度的蔗糖液替代细胞壁分解液，其他操作与实验组装片相同，制对照组装片。?

第三步：___________________________________________________________。?

（2）实验结果和解释：_____________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________________________。

Answer 1

(1) ①适宜浓度的蔗糖液，加入适量的纤维素酶和果胶酶

纤维素酶和果胶酶能高效、专一地水解细胞壁，适宜浓度的蔗糖液不会使原生质体过度吸水而胀破

②第一步：滴适量的细胞壁分解液在载玻片中央，用镊子撕取一小块紫色洋葱鳞片叶表皮浸泡在其中,盖上盖玻片。一段时间后，制得实验组装片

第三步：在显微镜下观察比较实验组和对照组装片

(2) 实验组装片的洋葱细胞呈分散的紫色球形，表明细胞壁已被分解掉。

对照组装片的洋葱细胞呈相互连接的紫色多边形，表明细胞壁未被分解。

解析:

（1）制备分解液的目的是去除植物细胞壁，植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，酶解去壁有专一性（一种酶只能催化水解一种反应或一类反应）故分解液应该含有纤维素酶和果胶酶。但同时还要考虑去壁后的原生质体吸水膨胀问题，所以纤维素酶和果胶酶在加入的同时，还要添加一定浓度的蔗糖液，以避免原生质体过度吸水而胀破。

（2）检验植物细胞壁是否去除的原理是看细胞的形态、相互连接的状况是否改变。而检验的最简便的方法是清水浸泡后显微镜观察。

（3）细胞分散则说明细胞壁已经不存在（被溶解了）；细胞未分散（细胞壁还存在）。

试题属于中等难度。