Question

16．中国科学院遗传所将菠菜碱性脱氢酶（BADH）基因导入水稻，获得的转基因水稻有较高的耐盐性，并能在盐田中结实．结合所学知识回答下列问题
（1）为了获得更多的BADH基因用于科研，可对其进行体外“克隆”．该技术指的是PCR技术．
（2）获取目的基因后需要进行基因表达载体的构建，基因表达载体中应有启动子、标记基因、目的基因终止子和复制原点．
（3）若制备人工种子，需利用植物组织培养技术．
（4）对于目的基因的检测和鉴定，可以进行分子水平检测和个体水平（或个体生物学水平）鉴定，后者需将耐盐水稻栽培于盐田中，以观察其生活状况．

Answer 1

分析 一、目的基因的获取
1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因．
2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_．
3、PCR技术扩增目的基因
二、基因表达载体包括：目的基因+启动子+终止子+标记基因．
三、目的基因的检测与鉴定：
1．分子水平上的检测
①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术
②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术
③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术
2．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等．例：用虫食用棉花，观察其存活情况，来鉴定棉花是否具有抗虫特性

解答 解：（1）在生物体外用PCR技术对目的基因进行扩增．
（2）基因表达载体结构中应该有启动子、标记基因、目的基因终止子和复制原点．
（3）若制备人工种子，需利用植物组织培养技术，培养到胚状体阶段，然后在胚状体外面包裹上人工种皮．
（4）对于目的基因的检测和鉴定，可以进行分子水平检测和个体水平（或个体生物学水平） 鉴定，后者需将耐盐水稻栽培于盐田中，以观察其生活状况．
故答案为：
（1）PCR
（2）启动子、标记基因、目的基因
（3）植物组织培养
（4）个体水平（或个体生物学水平）     盐田

点评 本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的原理、操作工具及操作步骤，掌握各步骤中的相关细节，能根据题干要求作出准确的判断，属于考纲识记层次的考查．