Question

【题目】埃博拉出血热是由埃博拉病毒引起的一种烈性传染病，死亡率在50％至90％之间。致死原因主要为中风、心肌梗塞、低血容量休克或多发性器官衰竭。下图是制备埃博拉病毒(EBOV)VP40蛋白的过程。请据图回答：

(1)埃博拉病毒是单链RNA病毒，可利用_____________法得到含(EBOV)VP40基因的DNA。过程①利用PCR技术扩增该DNA片段的前提是，要有一段_____________以便合成引物，该技术用到的酶是_________。

(2)过程②需要用到的工具酶是___________，一个完整的基因表达载体必须要有标记基因，标记基因的作用是__________。

(3)科学家制备(EBOV)VP40蛋白的目的是利用此蛋白进一步获取_________用于治疗埃博拉出血热。

(4)过程③中，选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有_____________(答出3点即可)。

Answer 1

【答案】反转录（逆转录） 已知目的基因的核苷酸序列 Taq酶（耐高温的DNA聚合酶） 限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶 鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来 单克隆抗体（抗体） 繁殖快、单细胞、遗传物质少、易培养

【解析】

基因工程的基本工具有：限制酶、DNA连接酶和载体。质粒DNA分子上有一个至多个限制酶切割位点，供外源DNA片段的质粒进入受体细胞后，停留在细胞中进行自我复制，或整合到染色体DNA上，随染色体DNA进行同步复制。质粒DNA分子上有特殊的遗传标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。利用PCR技术获取目的基因的前提，是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成引物。

(1)据分析可知，埃博拉病毒是单链RNA病毒，可利用逆转录法得到含(EBOV)VP40基因的DNA。过程①利用PCR技术扩增该DNA片段的前提是，要有一段已知目的基因的核苷酸序列以便合成引物，该技术用到的酶是Taq酶（耐高温的DNA聚合酶）。

(2)据分析可知，过程②需要用到的工具酶是限制酶（限制性核酸内切酶）、DNA连接酶，一个完整的基因表达载体必须要有标记基因，标记基因的作用是：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

(3)埃博拉病毒(EBOV)VP40蛋白相当于抗原，科学家制备(EBOV)VP40蛋白的目的是利用此蛋白进一步获取单克隆抗体（抗体）用于治疗埃博拉出血热。

(4)据分析可知，过程③中，选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有繁殖快、单细胞、遗传物质少、易培养。