Question

【题目】动物细胞融合技术突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。现在己经广泛应用于多种学科的研究：新发展起来的杂交瘤技术，为制备单克隆抗体开辟了新途径。研究表明DNA合成有两条途径：“S途径”和“D途径”，淋巴细胞(浆细胞)有“S途径”和“D途径”；骨髓瘤细胞只有“D途径”；HAT培养液中氨基喋呤可以阻断DNA合成的“D途径”。下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。回答下列问题：

⑴___________技术是单克隆抗体技术的基础。

⑵单克隆细胞是指__________________________________________________。

⑶单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是____________。

⑷杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的_____________特点，又具备淋巴细胞的__________特点。

⑸图示过程，有两次的筛选。第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞(浆细胞)在HAT培养液中不生长的原因是_________，骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是_______。

Answer 1

【答案】（1）细胞培养技术、细胞融合技术 （2）单个细胞增殖，形成的细胞群

（3）特异性强，灵敏度高 （4）在体外大量增殖（无限增殖） 分泌特异性抗体

（5）缺乏在体外培养液中增殖的能力 其DNA合成途径被氨基喋呤阻断而不能进行DNA复制

【解析】（1）细胞培养技术、细胞融合技术是单克隆抗体技术的基础。

（2）单克隆细胞是指单个细胞增殖，形成的细胞群。

（3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是特异性强，灵敏度高，可大量制备。

（4）杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的在体外大量增殖（无限增殖）的特点，又具备淋巴细胞能分泌特异性抗体的特点。

（5）图示过程中有两次的筛选，第一次是用HAT培养液筛选出杂交瘤细胞，那么淋巴细胞（效应B细胞）在HAT培养液中不生长的原因是缺乏在体外培养液中增殖的能力；骨髓瘤细胞在HAT培养液中不生长的原因是其DNA合成途径被氨基喋呤阻断而不能进行DNA复制。

项目	第一次筛选	第二次筛选
筛选原因	诱导融合后得到多种杂交细胞，另外还有未融合的细胞	由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激，所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞
筛选方法	用特定的选择培养基筛选：未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞（“BB”细胞、“瘤瘤”细胞）都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞（“B瘤”细胞）才能生长	用多孔培养皿培养，在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测，经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群
筛选目的	得到杂交瘤细胞	得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞