Question

【题目】根据所学知识，完成下列题目：

（1）为了获得能降解氯苯的微生物，可在被氯苯污染的土壤中取样，并应选用以________为碳源的培养液进行选择培养。除碳源外，培养液还应含有______________等营养物质。

（2）将获得的3种待选微生物甲、乙、丙分别接种在1 L含20 mg氯苯的相同培养液中培养，其他营养物质充裕、条件适宜，观测从实验开始到微生物停止生长所用的时间，甲、乙、丙分别为33 h、15 h、46 h，则应选择微生物________作为菌种进行后续培养。

（3）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可以在显微镜下用________直接计数，也可选用________法统计活菌数目。

（4）对选定的菌种进行细胞学检测，发现它没有具膜的细胞器，则该菌种与________（选填：乳酸菌、醋酸菌、酵母菌）结构相似，其产生的降解氯苯的酶蛋白可以用________法进行分离。

Answer 1

【答案】氯苯??? 氮源、无机盐、水??? 乙??? 血细胞计数板??? 稀释涂布平板??? 乳酸菌、醋酸菌??? 凝胶色谱???

【解析】

选择培养基是根据不同微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性不同而制备的培养基，能允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长。

微生物的培养基一般含有水、碳源、氮源和无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

微生物的计数方法分为直接计数法和间接计数法：直接计数法是利用特定血细胞计数板，在显微镜下直接计数一定容积的样品中微生物的数量，一般活菌、死菌都计算在内；间接计数法一般通过稀释涂布平板法计数活菌数量。

（1）为了获得能降解氯苯的微生物菌种，应选用以氯苯为碳源的培养液进行选择培养，在该培养液中，只有能降解氯苯的微生物才能生长，而其他微生物则不能生长。培养液中除含有碳源外，还应含有氮源、无机盐和水等。

（2）由题意可知，微生物乙在含有氯苯的培养液中从实验开始到停止生长所用的时间较微生物甲、丙短，说明微生物乙分解氯苯的能力比甲、丙更强，所以应选择微生物乙作为菌种进行后续培养。

（3）若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计活菌数目。

（4）选定的菌种没有具膜细胞器如线粒体等，则该菌种属于原核生物，乳酸菌和醋酸菌也属于原核生物，而酵母菌属于真核生物。其产生的降解氯苯的酶蛋白可用凝胶色谱法进行分离，凝胶色谱法是根据相对分子质量大小分离蛋白质的有效方法。