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    【题目】土霉素是-种可以治疗人类感染性疾病的抗生素类药物，易溶于乙醇（沸点78.5℃）和丙酮（沸点56℃），温度高于70℃时土霉素的结构会被破坏，可由土壤中放线菌的发酵产物中提取。回答下列相关问题：

    (1)从土样中筛选目的菌种并对其计数时，取样用的小铲子和盛土样的信封在使用前都需要灭菌，目的是防止外来杂菌的污染以保证______________________。

    (2)土壤中放线菌数目较少，可在梯度稀释前使用________（从培养基的物理状态和功能分析）培养基进行选择培养，此操作可达到的目的是_______________。当培养基上长出菌落后，可观察菌落的 __________________（至少答两点）来初步判断筛得菌种的种类。

    (3)分析可知，在使用萃取法从放线菌中提取土霉素时，最好选择____________作为萃取剂，以防止在__________过程中土霉素被破坏。放线菌除了能产生土霉素外还能产生四环素等其他抗生素，某同学对萃取得到的样品用纸层析法进行鉴定，用显色剂显色的结果如右图所示，分析图能否看出萃取样品中除了含有土霉素外还含有四环素？_____________，如能看出请说明理由，如不能看出请设计实验来证明萃取样品中是否还含有四环素（只要求写出实验设计思路）。 _______________________________________。

    【答案】 筛选得到的菌种全部来自于土样 液体选择 增加目的菌种的数目 菌落的形状、大小、隆起程度、颜色等 丙酮 浓缩 不能 利用四环素的标准样品作对照，再对萃取样品进行纸层析法来判断

    【解析】试题从物理状态看，培养基分为液体培养基和固体培养基等；从功能上看，分为选择培养基和鉴别培养基等；选择培养基是为了筛选所需的微生物种类，淘汰不需要的微生物种类；而鉴别培养基只是通过加入特定物质，根据菌落的特征确定某菌种的存在。用纸层析法进行对比分析，萃取样品中是否含所要确认的成分，则必须准备在所确认成分的标准样品。

    （1）从土样中筛选目的菌种时，取土样用的小铲子和盛土样的信封都要灭菌，目的是防止外来杂菌的污染，保证筛选得到的菌种全部来自于土样。

    （2）结合前面的分析，由于土样中含有多种微生物，而所需的菌种是土样中某中特定放线菌，所以需要在选择培养基中才能达到淘汰和筛选的目的；其次是因为土样中目的菌种太少，需要扩大目的菌的数量，为了菌株能充分利用培养基中营养成分，应采用液体培养基进行扩大培养。筛选判定目的菌株，需要通过观察菌落特征，如形状、大小、隆起程度、颜色等来确认。

    （3）由于土霉素在70℃时分子结构易被破坏，所以选择萃取剂时，应选沸点低于70℃的丙酮，以防止在浓缩过程中土霉素被破坏。分析该同学用纸层析法对萃取得到的样品的分离结果可知，根据B、C与A、D的对比只能得出，萃取样品中含有土霉素，不能得出是否含四环素。因为在A、D标准样品中不含四环素，所以要想确认萃取样品中含有四环素，需要利用四环素的标准样品作对照，再对萃取样品进行纸层析法来判断。

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