Question

12．微生物
炭疽杆菌能引起人畜患炭疽病．对炭疽病疑似患者，可通过图1所示鉴定炭疽杆菌的实验进行确诊．下表是培养炭疽杆菌的血琼脂培养基成分，其中实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌．

蛋白胨	10g
牛肉粉	3g
氯化钠	5g
脱纤维羊血 （含多种生长因子）	50mL
琼脂	15g
去离子水	1000mL

（1）据表分析“血琼脂培养基”属于①③．
①通用培养基     ②选择培养基     ③固体培养基    ④液体培养基
（2）为从炭疽病疑似患者体内分离出炭疽杆菌，将采集到的患者皮肤脓胞渗出物稀释后滴于培养基表面，用无菌玻璃刮铲涂匀，这种接种方法称为稀释涂布平板法．图2所示的四种菌落分布图中，不可能由该方法得到的是D．
（3）制备图1中的液体培养基时需采取高压蒸汽灭菌方法灭菌，目的是杀死微生物及芽孢．
（4）据图1分析，接种可疑菌后，经35℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是细菌大量繁殖，对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低（填“高”或“低”），则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．此实验依据的原理是实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清
（5）对排除的疑似患者及易感人群，可采取的最有效的预防措施是接种炭疽疫苗．

Answer 1

分析 1、培养基的基本成分：水、无机盐、碳源、氮源及特殊生长因子；
2、无菌操作，包括灭菌和消毒两种方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；灭菌的方法有干热灭菌、灼烧灭菌和高压蒸汽灭菌；
3、微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，常用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法．
4、微生物实验室分离中配制培养基的操作步骤：计算→称量→溶解→调pH→灭菌步骤．
5、培养基的分类有按物理性质分有固体、半固体、液体培养基；按用途分为选择培养基和鉴别培养基．

解答 解：（1）根据表格分析，该培养基含有牛肉膏、蛋白胨，是细菌的通用培养基，又因为含有琼脂，为固体培养基．
（2）稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分布涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养．由图中四种菌落分布情况可知，A、B和C是采用稀释涂布平板法得到的，而D是采用平板划线法得到的．
（3）制备图1中的液体培养基时应该用高压蒸汽灭菌 法进行灭菌，以杀死微生物及芽孢．
（4）接种可疑菌后，35℃培养24小时，细菌大量繁殖，液体培养基变浑浊．对照组试管中应加入等量生理盐水，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组低，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除．此实验依据的原理是实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清．
（5）对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体和记忆细胞而获得没免疫能力．
故答案为：
（1）①③
（2）稀释涂布平板法   D
（3）高压蒸汽灭菌     杀死微生物及芽孢
（4）细菌大量繁殖    等量生理盐水   低   实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽杆菌，使细菌死亡，溶液变澄清．
（5）接种炭疽疫苗

点评 本题考查微生物培养等相关知识，意在考查考生能理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力．